Микронуклеус менен кометалык анализдин ортосундагы негизги айырмачылык микронуклеустун анализи мутагендик таасирдин натыйжасында хромосомалык бузулууну текшерүү үчүн маанилүү, ал эми комета анализи айрым клеткалардагы ДНКнын негизги бузулушун аныктоо үчүн маанилүү.
Генотоксиктиктин анализдери мутациялардын жана хромосомалык аномалиялардын мүмкүнчүлүктөрүн баалоого жардам берет. Генотоксиндерге химиялык заттар жана радиация кирет. Канцерогендер, мутагендер жана тератогендер генотоксиндердин негизги категориялары болуп саналат. Алар чекиттик мутациялар, жок кылуулар, бир жана эки тилкелүү үзүлүүлөр, хромосомалык аберрациялар, микронуклеалардын пайда болушу, ДНКнын оңдоосу жана клетка циклинин өз ара аракеттенүүсү сыяктуу ар кандай зыяндарды жаратат. Мындай шарттар ар кандай ооруларга алып келиши мүмкүн жана генотоксиктик анализдер бул шарттардан болуучу зыяндын алдын алат. Микронуклеустун анализи жана комета анализи генотоксиктүүлүк анализинин эки ыкмасы болуп саналат.
Микронуклеус анализи деген эмне?
Микронуклеус анализи – мутагендик таасирдин натыйжасында хромосомалык зыянды баалоо үчүн анализ. Бул шпинделдин пайда болушуна жана микронуклеаларга себеп болгон химиялык заттарды текшерүүдө маанилүү. Микронуклеустун анализи хромосоманын түзүлүшүнө жана функциясына кийлигишкенде химиялык заттардын туруктуулугу жөнүндө маалымат берет. Көптөгөн канцерогендер микронуклеус анализдеринде оң натыйжа берет. Анализ процесси химиялык тазалоону жана микронуклеаттуу клеткалардын жыштыгын өлчөөнү камтыйт. Эгерде микронуклеилердин саны анормалдуу көбөйсө, химиялык зат хромосомалардын бузулушуна алып келет деген тыянакка келет.
Микронуклеустун анализи адатта активдүү бөлүнүүчү клеткаларда жүргүзүлөт. Ошондуктан, клетканын бөлүнүшү аркылуу өндүрүлгөн эритроциттер жана жилик чучугунун өзөк клеткалары мындай анализдер үчүн идеалдуу талапкерлер болуп саналат. Алар туруктуу жана тез жүгүртүүгө дуушар болушат. Эритроциттердин чыныгы ядролору болбогондуктан, анализдин аягында микронуклеаттуу клеткаларды айкыныраак кылат.
01-сүрөт: Микронуклеустун анализин байкоо
Микронуклеус анализдери үнөмдүү, тезирээк, ыңгайлуу жана аткаруу үчүн азыраак көндүмдөрдү талап кылат. Алар хромосомалык аберрацияларды ишенимдүү түрдө тез чагылдырат жана хромосомалык зыяндарды тез баалоо үчүн абдан пайдалуу. Микронуклеус анализинин өзгөчө жана ар тараптуу түрү цитокинез блок микронуклеус цитомунун (CBMNcyt) анализи болуп саналат. Клеткалардагы хромосомалык зыянды жана туруксуздукту өлчөө үчүн артыкчылыктуу анализ. Бирок, микронуклеустун анализин колдонуунун негизги көйгөйү, ал хромосомалык аберрациялардын ар кандай түрлөрүн аныктай албайт жана анализ митоздук ылдамдыкка жана клетка өлүмүнүн пропорциясына таасирин тийгизип, натыйжалардын өзгөрүшүнө алып келет.
Комета анализи деген эмне?
Бир гель электрофорез анализи катары да белгилүү болгон комета анализи ДНКнын бузулушун аныктоо үчүн жөнөкөй жана сезгич ыкма. Бул эукариоттук клеткалардагы ДНК бузулууларын өлчөйт жана биомониторинг жана генотоксиктүүлүк тестирлөөнүн стандарттуу ыкмасы.
Комета анализи эрүү температурасы төмөн агароздук суспензиялардагы клеткаларды капсулдаштырууга, нейтралдуу же щелочтук шарттарда клеткаларды лизиске жана токтотулган лизис клеткаларынын электрофорезине катышат. Инкапсуляция процессинде клеткалар эрүү температурасы төмөн агарозада суспензияланат жана агароза аларды өз ордуна бекитүү үчүн карбонгидрат жипчелеринин матрицасын түзөт. Агароза осмостук жактан нейтралдуу; ошондуктан ал эритмелердин гелдин ичине кирип, клеткаларды бузбастан жана жылдырбай таасир этет. Лизис эритмеси жогорку концентрациялуу суудагы туз эритмеси жана жуучу каражат болуп саналат. Бул туз клеткадагы РНК мазмунун бузуп, клетканын ичиндеги протеиндерди жана байланыш схемаларын бузат. Клеткалар жок кылып, бардык белоктор, РНК, цитоплазмалык жана нуклеоплазмалык компоненттер агароздук матрицаны бузуп, ДНКны калтырат.
02-сүрөт: Комета анализи
Электрофорез эритмеси щелочтуу эритме болуп саналат, анда ДНКнын кош спиралы денатурацияланып, нуклеоид бир тилкелүү болуп калат. Бул процесс учурунда сүрөттөрдү талдоо үчүн электр талаасы колдонулат. Сүрөт анализи ДНК жана нуклеоид үчүн флуоресценциянын жалпы интенсивдүүлүгүн өлчөйт жана экөөнү салыштырат. Жалпы түзүлүшү калган бузулбаган ДНКга туура келген тегерек башы жана бузулган ДНК үчүн куйругу бар кометага окшош. Күчтүү сигналдардан улам куйругу канчалык жарык жана узун болсо, зыяндын деңгээли ошончолук жогору болот.
Микронуклеус менен комета анализинин кандай окшоштуктары бар?
- Микронуклеус жана кометалык анализ үнөмдүү, тезирээк, ыңгайлуу жана азыраак көндүмдөрдү талап кылат.
- Алар негизинен ДНКда жасалат.
- Эки анализ мутацияларды жана хромосомалык аномалияларды баалоого жардам берет.
- Мындан тышкары, эки техника тең процедураны аткаруу үчүн химиялык заттарды колдонот.
Микронуклеус менен кометалык анализдин ортосунда кандай айырма бар?
Микронуклеустун анализи мутагендик таасирдин натыйжасында хромосомалык зыянды текшерүүдө маанилүү, ал эми комета анализи айрым клеткалардагы ДНКнын негизги бузулушун аныктоодо маанилүү. Ошентип, бул микронуклеус менен кометалык анализдин ортосундагы негизги айырма. Ошондой эле, микронуклеус анализи кластогендүүлүктү жана аневгендүүлүктү аныктоо үчүн жакшы түзүлгөн. Комета анализи клеткалардагы ДНКнын негизги бузулушун аныктоо үчүн генотоксиктик тест катары колдонулат. Мындан тышкары, микронуклеус анализи химиялык заттардын туруктуулугу жөнүндө маалымат берет, ал эми комета анализи бир клетка гелинин электрофорези.
Төмөнкү инфографикада микронуклеус менен кометанын ортосундагы айырмачылыктар жанаша салыштыруу үчүн таблица түрүндө берилген.
Кыскача маалымат – Микронуклеус менен Комета анализи
Генотоксиктиктин анализдери мутациялардын жана хромосомалык аномалиялардын мүмкүнчүлүктөрүн баалоого жардам берет. Микронуклеустун анализи жана комета анализи генотоксиктүүлүк анализинин эки ыкмасы болуп саналат. Микронуклеустун анализи хромосомалык зыянды мутагендик таасирдин натыйжасы катары баалайт. Комета анализи ДНКнын бузулушун аныктоо үчүн жөнөкөй жана сезимтал ыкма болуп саналат. Ошентип, бул микронуклеус менен кометалык анализдин ортосундагы негизги айырма. Микронуклеустун анализи шпинделдин пайда болушуна жана микронуклеаларга себеп болгон химиялык заттарды текшерүүдө маанилүү. Комета анализи эрүү температурасы төмөн агароздук суспензиялардагы клеткаларды капсулдаштырууга, нейтралдуу же щелочтук шарттарда клеткаларды лизиске жана суспензияга алынган клеткалардын электрофорезине катышат.
