Колорометрикалык жана флюорометриялык анализдин негизги айырмасы - колориметриялык анализ эритмедеги түстүү кошулмалардын концентрациясын, ал эми флюорометрдик анализ эритменин кинетикалык механизмин аныктайт.
Биохимиялык анализ – биологиялык молекуланын же заттын активдүүлүгүн аналитикалык жол менен аныктоочу же сандык аныктоочу ыкма. Бул in vitro процесси. Колориметрдик анализ жана флюорометрдик анализ лабораторияларда жүргүзүлүүчү жалпы биохимиялык анализдердин эки түрү. ELISA жана western blotting сыяктуу бир нече ыкмалар метаболизмдин активдүүлүгүн сандык аныктоо жана белоктор, ферменттер жана башка майда молекулалар сыяктуу биомолекулалардын функционалдык жүрүм-турумун өлчөө үчүн татаал биохимиялык анализдер болуп саналат. Анализдердин бул түрлөрү протеин-ДНК, белок-РНК жана белок-белоктун өз ара аракеттенүүсүн аныктоо үчүн колдонулат.
Колориметрикалык анализ деген эмне?
Колориметриялык анализ - эритмедеги түстүү кошулмалардын концентрациясын аныктоочу ыкма. Башка сөз менен айтканда, колориметриялык анализ реагенттер менен аналиттердин ортосундагы ферменттик же химиялык реакциянын натыйжасында түстүн өзгөрүшүнө алып келген реакция. Колориметриялык анализдер биохимияда ферменттерди, спецификалык кошулмаларды, гормондорду, антителолорду жана башка аналиттерди текшерүү үчүн колдонулат. Алар колориметрлерди же спектрофотометрлерди колдонушат. Колориметрлер түстүү үлгүлөрдү объективдүү өлчөө үчүн түстүү үлгүлөрдү мүнөздөгөн аспаптар. Спектрофотометр – жарыктын түсүнө же толкун узундугуна жараша жарыктын интенсивдүүлүгүн өлчөөчү аспап.
01-сүрөт: Колориметрикалык анализ
Колориметрикалык анализ кантип иштейт?
Колориметриялык анализде пластинка атайын антитело менен скважиналарга байланган даярдалат. Андан кийин үлгү кошулат. Бул үлгү антитело менен байланышууга мүмкүндүк берет. Андан кийин аныктоочу антитело жана субстрат детектордук зонд менен реакция кылуу үчүн кудуктарга кошулат. Токтотуу чечими окуунун алдында аягында кошулат. Бланка деп аталган бош скважина үлгүсүз калат. Колориметрдик анализде түс канчалык күңүрт болсо, аналиттин концентрациясы ошончолук жогору болот. Адатта, окууну алуу үчүн бир гана толкун узундугу керек. Бирок эгер шилтеме өлчөө болсо, эки же андан көп толкун узундуктары колдонулат.
Флюорометриялык анализ деген эмне?
Флюорометриялык анализ - ферменттик реакциялардын кинетикалык механизмин аныктоочу ыкма. Флуорометриялык анализ флуоресценттик эмес субстраттан флуоресценттүү продуктунун пайда болушу менен ишке ашат же тескерисинче. Бул анализ ошондой эле флуоресценттик резонанстык энергиянын трансферин (FRET) колдонот, мында ферменттик реакция субстраттагы эки флуорофордун абалын өзгөртүп, флуоресценттин интенсивдүүлүгүн өзгөртөт.
02-сүрөт: Флюорометриялык анализ
Флюорометриялык анализдер көбүнчө башка анализдерге караганда алда канча сезгич. Оорулуулардын кыртыш, клетка же суюктук үлгүлөрүндөгү диагностикалык ферменттин баалоолору анын сезгичтиги жогору болгондуктан көбөйөт.
Флюорометриялык анализ кантип иштейт?
Флюорометрдик анализде пластинкадагы үлгүгө субстрат кошулат жана флуоресценттик реакция пластинка окугучту колдонуу менен алынат. Бул жерде ар бир клетка өзүнчө өлчөнөт. Тунук эмес плиталар флюорометрдик анализде колдонулат. Бул жарыктын чачырандылыгын азайтат. Бул түрдөгү анализ үчүн эки толкун узундуктары керек. Бир толкун узундугу дүүлүктүрүүнү аныктоо үчүн, ал эми экинчи толкун узундугу эмиссия үчүн.
Колорометрикалык жана флюорометриялык анализдин кандай окшоштуктары бар?
- Колорометрикалык анализ жана флюорометриялык анализ - биохимиялык анализдин эки түрү.
- Эки анализ тең медициналык диагностика үчүн жүргүзүлөт.
- Бул анализдер ферменттик реакцияны камтыйт.
- Эки анализге тең субстрат жана аналиттер кирет.
Колорометрикалык жана флюорометриялык анализдин ортосунда кандай айырма бар?
Колорометрикалык анализ - эритмедеги түстүү кошулмалардын концентрациясын аныктоочу ыкма, ал эми флюорометриялык анализ - ферменттик реакциялардын кинетикалык механизмин аныктоочу ыкма. Ошентип, бул колориметриялык жана флюорометрдик анализдин ортосундагы негизги айырма. Мындан тышкары, флюорометриялык анализдер колориметриялык анализдерге караганда сезгичирээк; ошентип, флюорометрдик анализдер көбүрөөк аналиттерди аныктоо мүмкүнчүлүгүнө ээ. Ошентип, бул колориметрдик жана флюорометрдик анализдин дагы бир маанилүү айырмасы. Мындан тышкары, флюорометриялык анализдер эки толкун узундугун талап кылат, ал эми колориметриялык анализдер бир толкун узундугу менен жүргүзүлөт.
Төмөнкү инфографикада колориметрдик жана флюорометрдик анализдин ортосундагы көбүрөөк айырмачылыктар келтирилген.
Кыскача маалымат – Колориметрдик жана Флюорометрдик анализ
Биохимиялык анализ клеткадагы зат алмашуу реакцияларын аныктоо жана сандык аныктоо үчүн колдонулган аналитикалык процесс. Колориметрдик анализ жана флюорометрдик анализ биохимиялык анализдердин эки түрү болуп саналат. Колориметрдик анализ реагенттер менен аналиттердин ортосундагы ферменттик же химиялык реакциянын натыйжасында түстүн өзгөрүшүнө алып келген реакция, ал эми флюорометриялык анализ ферменттик реакциялардын кинетикалык механизмин аныктоо үчүн колдонулган ыкма. Эки анализ тең субстрат менен аналитти камтыган ферменттик реакцияга көз каранды. Флюорометриялык анализдер колориметриялык анализдерге караганда сезгич. Баарынан маанилүүсү, флюорометриялык анализдер эки толкун узундугун талап кылат, ал эми колориметриялык анализдер бир гана толкун узундугу менен жүргүзүлүшү мүмкүн. Ошентип, бул колориметрдик жана флюорометрдик анализдин ортосундагы айырманы жалпылайт.
