Клондоштуруу вектору менен экспрессия векторунун негизги айырмасы клондоо вектору бөтөн ДНК фрагментин кабыл алуучу клеткага ташыйт, ал эми экспрессия вектору гендердин белокторго экспрессиясын жеңилдетет.
Вектор молекулярдык биологиядагы маанилүү термин. Рекомбинантты ДНК технологиясында вектордун негизги ролу кабыл алуучу клеткага киргизиле турган пайдалуу ДНК фракциясына транспорттук режимди камсыз кылуу болуп саналат. Болгондо да, ал экспрессиялоо же репликациялоо үчүн кабыл алуучу клеткага жасалма жол менен чет өлкөлүк ДНК фрагментин алып жүрүү үчүн колдонулган бир ДНК молекуласы. Көбүнчө колдонулган векторлор плазмидалар, вирустук векторлор, космиддер жана жасалма хромосомалар. Клондоо вектору жана экспрессия вектору - бул векторлордун эки түрү, алардын колдонмолоруна жараша классификацияланган.
Клондоочу вектор деген эмне?
Клондоштуруу вектору – бул бөтөн ДНК молекуласын киргизүү үчүн колдонула турган жана клондоо максатында хостко киргизүү мүмкүнчүлүгү бар ДНКнын бир бөлүгү. Клондоштуруу векторунун идеалдуу мүнөздөмөсү – рестрикциондук фермент менен дарылоо жана лигатордук фермент менен дарылоо аркылуу ДНК фрагментин оңой киргизүү/чыгаруу. Бул аспектте көп колдонулган клондоо векторлору гендик инженерияланган плазмиддер.
01-сүрөт: Клондоо вектору
Клондоштуруу векторунун бир нече клондоо сайты, тандалма маркер гени жана кабарчы гени болушу керек. Клондоо сайтынын максаты клондоо үчүн жерди камсыз кылуу болуп саналат. Тандалма маркер ген клондоодон кийин ийгиликтүү рекомбинанттарды аныктоого жардам берет, ал эми кабарчы ген клондоодон кийин рекомбинанттардын арасында туура рекомбинантты скринингге жана аныктоого мүмкүндүк берет. Клондоо вектору сөзсүз эле чет элдик ДНК коддогон протеинди экспрессиялоого жардам бербейт. Ошентип, клондоштуруу векторунун бирден-бир максаты – бөтөн ДНКны хостко жеткирүү.
Экспрессия вектору деген эмне?
Экспрессия вектору, ошондой эле экспрессия конструкциясы деп аталат, кабыл алуучу клетканын ичиндеги белокторду экспрессиялоо үчүн колдонулган вектордун бир түрү. Кандайдыр бир вектор сыяктуу эле, бул да бир нече клондоочу сайттын негизги бөлүктөрүн, маркер генди жана кабарчы генди камтышы керек. Вектор кожоюнга жаңы генди киргизет жана хосттун протеин синтезинин механизмин колдонуу менен генди хозяинге экспрессиялоого мүмкүндүк берет. Мындан тышкары, анын баштапкы багыты туруктуу м-РНКны түзүү жана ошону менен белокторду түзүү болуп саналат. Жакшы мисалдардын бири - инсулиндин коммерциялык өндүрүшү. Инсулин гени бактериялык плазмидага киргизилип, кайра Е.coli бактериясынын денеси, плазмиддердин көбөйүшүнө жана E. coli көбөйүшүнө мүмкүндүк берип, чогултулуп жана колдонула турган инсулинди бөлүп чыгарат.
02-сүрөт: туюнтма вектору
Мындан тышкары, экспрессия векторунун күчтүү промоутер аймагы, туура котормо баштоо ырааттуулугу жана туура терминатор кодону жана ырааттуулугу болушу керек. Экспрессия векторлору фармацевтикалык өнөр жайы үчүн пептиддерди жана протеиндерди өндүрүүдө көптөгөн колдонмолорго ээ, мисалы, инсулин, өсүү гормону, антибиотиктер, вакциналар, антителолор. Мындан тышкары, экспрессия векторлору тамак-аш жана тигүү өнөр жайларында ферменттерди өндүрүүгө жардам берет. Ал гана эмес, экспрессия векторлору трансгендик өсүмдүктөрдү, мисалы, алтын күрүчтү, курт-кумурскаларга туруктуу өсүмдүктөрдү, гербициддерге туруктуу өсүмдүктөрдү ж.
Клондоо вектору менен экспрессия векторунун кандай окшоштуктары бар?
- Клондоо вектору жана экспрессия вектору - биз рекомбинантты ДНК технологиясында жана генетикалык инженерияда колдонгон векторлордун эки түрү.
- Экөө тең маркер генди жана кабарчы генди камтыйт.
- Андан тышкары, алар бир нече клондоо сайттарынан турат.
- Ошондой эле алардын репликациянын келип чыгышы жана өзүн-өзү кайталоо жөндөмү бар.
Клондоо вектору менен экспрессия векторунун ортосунда кандай айырма бар?
Клондоштуруу вектору – бул бөтөн ДНК фрагментин кабыл алуучу клеткага ташыган кичинекей ДНК молекуласы, ал эми экспрессия вектору – гендердин киришин, экспрессиясын жана белокторду өндүрүүнү жеңилдеткен вектордун бир түрү. Ошентип, бул клондоо вектору менен экспрессия векторунун ортосундагы негизги айырма. Мындан тышкары, клондоо вектору менен экспрессия векторунун дагы бир олуттуу айырмасы, клондоо вектору бөтөн ДНК фрагментин кабыл алуучуга киргизет, ал эми экспрессия векторлору киргизилген генди тиешелүү протеинди өндүрүү менен экспрессиялайт.
Мындан тышкары, клондоо вектору репликациянын келип чыгышынан, чектөө сайттарынан жана тандалуучу маркерден турат. Ал эми экспрессия вектору күчөткүчтөрдү, промотор аймагын, аяктоо кодонун, транскрипциянын башталышынын ырааттуулугун, репликациянын келип чыгышын, чектөө жерлерин жана тандалма маркерди камтыйт. Демек, бул клондоо вектору менен экспрессия векторунун ортосундагы айырма. Мындан тышкары, плазмидалар, бактериофагдар, бактериялык жасалма хромосомалар, космиддер, сүт эмүүчүлөрдүн жасалма хромосомалары, ачыткы жасалма хромосомалар жана башкалар клондоштуруучу векторлордун мисалдары болуп саналат. Ошол эле учурда экспрессия векторлору көбүнчө плазмидалар.
Корытынды – Клондоо вектор менен туюнтма вектору
Молекулярдык биологиядагы функцияларынын негизинде клондоо вектору жана экспрессия вектору сыяктуу векторлордун эки түрү бар. Клондоо вектору – бул бөтөн ДНКны кабыл алуучу клеткага жеткирүүчү кичинекей ДНК молекуласы. Плазмидалар, бактериофагдар, бактериялык жасалма хромосомалар, космиддер жана сүт эмүүчүлөрдүн жасалма хромосомалары сыяктуу клондоочу векторлордун ар кандай түрлөрү бар. Ал эми экспрессия вектору – бул генди кабыл алуучу клеткага киргизген жана белок продуктусун алуу үчүн ген экспрессиясын жеңилдеткен плазмид. Экспрессия векторлору плазмидалар. Ошентип, бул клондоо вектору менен экспрессия векторунун ортосундагы айырманын корутундусу.
