Шаттл вектор менен экспрессия векторунун негизги айырмасы, бул вектор көбүнчө клеткалардагы ген экспрессиясын изилдөө үчүн иштелип чыкпаган плазмид, ал эми экспрессия вектору адатта ген экспрессиясын изилдөө үчүн иштелип чыккан плазмид же вирус болуп саналат. клеткалар.
Молекулярдык биологияда вектор – бул бөтөн генетикалык материалды башка клеткага алып өтүү үчүн транспорт каражаты катары колдонулган ДНК молекуласы, ал жерде аны репликациялоого же экспрессиялоого болот. Чет өлкөлүк генетикалык материалдын вектор менен байланышы жалпысынан рекомбинантты ДНК молекуласы деп аталат. Векторлордун төрт негизги түрү плазмидалар, вирустук векторлор, космиддер жана жасалма хромосомалар. Алардын ичинен эң көп колдонулган векторлор плазмидалар. Шаттл вектор жана экспрессия вектору молекулярдык биологияда колдонулган векторлордун эки түрү.
Шаттл вектору деген эмне?
Шаттл вектору - эки башка хост түрүндө жайылтууга арналган вектор. Ошондуктан, чөлмөк векторуна киргизилген чет элдик ДНКны эки башка клетка түрүндө сынап же башкарса болот. Адатта, шаттл векторунун эки репликациясы бар, алардын ар бири хостко мүнөздүү. Шаттл векторлору эки башка хостто кайталангандыктан, алар эки функционалдуу векторлор катары да белгилүү. Популярдуу маршруттук векторлордун бири - ачыткы челнок вектору. Мындан тышкары, дээрлик бардык көп колдонулган Saccharomyces cerevisiae векторлору шаттл векторлор болуп саналат. Мисалы, ачыткы челнок вектору ачыткы клеткаларында, ошондой эле E. coli клеткаларында репликацияга жана тандоого мүмкүндүк берүүчү компоненттерди камтыйт. Ачыткы челиктин векторунун E.coli компоненттери репликациянын келип чыгышы жана тандалма маркер (мис.ж., антибиотиктерге туруктуулук, бета-лактамаза). Ачыткы челекторунун векторунун ачыткы компоненттери автономдуу репликациялануучу ырааттуулук (ARS), ачыткы центромера (CEN) жана тандалма ачыткы маркери (мисалы, URA3- урацил синтези үчүн ферментти коддогон ген)
Экспрессия вектору деген эмне?
Экспрессия вектору көбүнчө клеткаларда ген экспрессиясы үчүн түзүлгөн плазмида же вирус болуп саналат. Бул вектор максаттуу клеткага белгилүү бир генди киргизүү үчүн колдонулат. Бул вектор белгилүү бир ген тарабынан коддолгон протеинди өндүрүү үчүн клетканын белок синтези механизмин көзөмөлдөй алат. Экспрессия вектору клетканын ичинде болгондон кийин, бөтөн ген тарабынан коддолгон протеин клеткалык котормо механизминин рибосома комплекстери аркылуу өндүрүлөт.
01-сүрөт: туюнтма вектору
Экспрессия вектору бөтөн гендин эффективдүү транскрипциясына алып келүүчү күчөтүүчү жана промоутер аймактардын ролун аткарган жөнгө салуучу ырааттуулуктарды камтуу үчүн иштелип чыккан. Демек, туруктуу кабарчы РНК (мРНК) олуттуу көлөмү кийинчерээк белгилүү бир белокторго которулушу мүмкүн. Экспрессия векторунун жардамы менен белоктун экспрессиясы катуу көзөмөлгө алынышы мүмкүн. Белок индуктордун жардамы менен зарыл болгон учурда олуттуу өлчөмдө өндүрүлөт. Бирок кээ бир системаларда протеин конститутивдүү түрдө экспрессияланышы мүмкүн. Экспрессия векторунун кеңири таралган мисалы pCI сүт эмүүчүлөрдүн вектору.
Шаттл векторунун жана экспрессиялык вектордун кандай окшоштуктары бар?
- Шаттл вектор жана экспрессия вектору молекулярдык биологияда колдонулган векторлордун эки түрү.
- Векторлордун эки түрү тең плазмидалар болушу мүмкүн.
- Векторлордун бул түрлөрү репликациянын келип чыгышына ээ.
- Векторлордун эки түрү тең клондоо сайттарына ээ.
- Бул векторлордун тандалма маркерлери бар (антибиотикке туруктуулук).
Шаттл векторунун жана экспрессиялык вектордун ортосунда кандай айырма бар?
Шаттл вектору адатта клеткаларда ген экспрессиясын изилдөө үчүн иштелип чыкпаган плазмид, ал эми экспрессия вектору адатта клеткалардагы ген экспрессиясын изилдөө үчүн иштелип чыккан плазмид же вирус. Ошентип, бул шаттл вектор менен туюнтма векторунун ортосундагы негизги айырма. Мындан тышкары, шаттл вектору күчтүү промоутер, күчөтүүчү, индуктор жана портативдик котормо баштоо ырааттуулугу (PTIS) жана күчтүү терминатор сыяктуу жөнгө салуучу ырааттуулуктарга муктаж эмес. Экинчи жагынан, экспрессия векторуна күчтүү промоутер, күчөткүч, индуктор жана көчмө котормо баштоо ырааттуулугу (PTIS) жана күчтүү терминатор сыяктуу жөнгө салуучу ырааттуулук керек.
Төмөнкү инфографикада шаттл вектор менен экспрессия векторунун ортосундагы айырмачылыктар жанаша салыштыруу үчүн таблица түрүндө берилген.
Кыскача маалымат – Шаттл векторуна каршы экспрессиялык вектор
Шаттл вектор жана экспрессия вектору молекулярдык биологиялык эксперименттерде колдонулган векторлордун эки түрү. Шаттл вектору, адатта, клеткаларда ген экспрессиясын изилдөө үчүн иштелип чыкпаган плазмид, ал эми экспрессия вектору көбүнчө клеткалардагы ген экспрессиясын изилдөө үчүн иштелип чыккан плазмид же вирус. Демек, бул шаттл вектор менен экспрессия векторунун ортосундагы негизги айырма.
