Негизги айырмасы – In Situ гибриддештирүү жана иммуногистохимия
Рак жана жугуштуу оорулардын диагностикасы – шишиктерди же инфекциялык клеткаларды, анын көбөйүшүн жана клетканын өнүгүү жерлерин аныктоо жана көпчүлүк жугуштуу жана жугуштуу оорулардын генетикалык негиздерин талдоо максатында жаңы протеомика жана геномикага негизделген ыкмалар колдонулган популярдуу тенденция. жугуштуу эмес оорулар. Бул дары-дармектерди так иштетүүгө жана долбоорлоого жана ооруларга ылайыкташтырылган терапияны иштеп чыгууга алып келет. In situ гибриддештирүү (ISH) жана Иммуногистохимия (IHC) рак биологиясында кеңири колдонулган эки ыкма жана in situ гибриддештирүү менен иммунохимиянын ортосундагы негизги айырма талдоо процедурасында колдонулган молекулаларда болот. ISHда нуклеин кислотасынын зонддору анализде колдонулат, ал эми IHCде диагностикалык аныктоо үчүн моноклондук жана поликлоналдык антителолор колдонулат.
In Situ Hybridization (ISH) деген эмне?
In situ гибриддештирүү - бул нуклеиндик кислотаны гибриддештирүү ыкмасы, ал түздөн-түз кыртыштын бир бөлүгүндө же бөлүмүндө, бүт кыртышта же клеткаларда аткарылат. Техника Уотсон Криктин толуктоочу база жупташтыруу теориясына көз каранды, натыйжада мутацияланган гендерди аныктай турган же керектүү генди аныктай турган ДНК-ДНК гибриддери же ДНК-РНК гибриддери пайда болот. Гибриддештирүү техникасы учурунда зонд катары бир катарлуу ДНК ырааттуулугу, кош тилкелүү ДНК ырааттуулугу, бир тилкелүү РНК ырааттуулугу же синтетикалык олигонуклеотид ырааттуулугу колдонулат жана бул зонддор идентификациялоо процедуралары үчүн 5' учунда радиоактивдүү фосфор менен белгиленет же авторадиограммалар менен белгиленет.. Колдонулган зонддун түрүнө жана визуалдаштыруу техникасынын түрүнө жараша жеткиликтүү ISH ыкмаларынын ар кандай түрлөрү бар.
01-сүрөт: Fluorescent In Situ гибриддештирүү
ISHтин көптөгөн колдонмолору бар, негизинен жугуштуу оорулардын молекулярдык диагностикасында козгогучтардын бар экендигин аныктоо жана молекулярдык диагностика аркылуу козгогучту тастыктоо үчүн. Ошондой эле өнүгүү биологиясы, кариотиптөө жана филогенетикалык анализ жана хромосомалардын физикалык картасын түзүү тармактарында колдонулат.
Иммуногистохимия (IHC) деген эмне?
IHC техникасында анализделген негизги молекула антиген болуп саналат. IHC учурунда моноклоналдык жана поликлоналдык антителолор инфекциянын же зыяндуу клетканын пролиферациясынын абалын аныктоо үчүн колдонулат. Техника антиген-антитело байланышына негизделген жана бул ыкма үчүн фермент энбелгилери колдонулат; Мындай колдонмолордун бири ELISA (ферменттик иммуносорбенттик анализ) болуп саналат. Маркерлер флуоресценттүү теги бар антителолор же радио менен белгиленген антителолор болушу мүмкүн.
02-сүрөт: Иммуногистохимия
IHC рак клеткаларын аныктоо үчүн кеңири колдонулат. Диагностикалык процедуралар шишик клеткаларында бар антигендерге шишикти аныктоо жана мүнөздөө үчүн багытталган. Ошол эле жол-жобосу жугуштуу агенттерди аныктоо үчүн киргизилген. Моноклоналдык жана Поликлоналдык антителолор ошондой эле керектүү протеин менен синтетикалык антителолордун ортосундагы антитело-антиген байланыш реакциясын иштетүү аркылуу ар кандай ген продуктуларын талдоо үчүн колдонулат.
In Situ гибриддештирүү менен иммуногистохимиянын кандай окшоштуктары бар?
- ISH жана IHC өтө өзгөчө реакциялар.
- Эки техника тең абдан так.
- Эки ыкманы тең рак жана жугуштуу ооруларды диагностикалоодо колдонсо болот.
- Бул ыкмалар стерилдүү in-vitro чөйрөлөрүндө аткарылат.
- Экөө тең кайталануучу натыйжаларды берген тез ыкмалар.
- ISH жана IHC радио этикеткалоо жана флуоресценция ыкмалары сыяктуу аныктоо ыкмаларын колдонушат.
In Situ гибриддештирүү менен иммуногистохимиянын ортосунда кандай айырма бар?
In Situ гибриддештирүү жана иммуногистохимия |
|
| ISH – нуклеиндик кислотаны гибриддештирүү ыкмасы, ал түздөн-түз кыртыштын бир бөлүгүнө же кесилишине же бүт кыртышка аткарылат. | IHC – клетканын бетине жайгаштырылган атайын белок маркерлери болгон антигендердин бар-жоктугун аныктоо үчүн моноклондук жана поликлоналдык антителолор колдонулган ыкма. |
| Анализделген биомолекулалардын түрү | |
| ISH нуклеиндик кислоталарды талдайт. | IHC белоктор-антигендерди талдайт. |
| Биохимиялык реакциянын негизи | |
| ДНК-ДНК же ДНК-РНК ортосундагы кошумча база жупташтыруу бул техникада пайда болот. | Антиген-антитело өз ара аракеттешүүсү иммуногистохимияга катышат. |
| Фермент менен байланышкан аныктоо ыкмалары | |
| Фермент менен байланышкан аныктоо ыкмаларын ISHде колдонууга болбойт. | Фермент менен байланышкан аныктоо ыкмаларын IHCде колдонсо болот. |
Кыскача маалымат – In Situ гибриддештирүү жана иммуногистохимия
Молекулярдык диагностика – бул оорунун көрүнүшүнө алып келген клеткаларда бар молекулярдык маркерлердин негизинде рак же жугуштуу оору, мисалы ВИЧ же кургак учук сыяктуу жугуштуу эмес ооруну аныктоо үчүн колдонула турган тез жана ырастоочу методдор. Молекулярдык маркерлер экспрессиялык протеиндер түрүндө же генетикалык деңгээлде болушу мүмкүн, анын негизинде эффективдүүлүктү жогорулатуу үчүн ар кандай жаңы ыкмалар киргизилет жана бул ыкмалар менен байланышкан чоң чыгым бар, бирок азыраак эмгекти талап кылат. Ошентип, ISH ДНК-ДНК же ДНК-РНК гибриддик түзүлүшүнө көз каранды, ал эми IHC антитело менен антигендин ортосундагы өзгөчө реакцияларга көз каранды. Бул in situ гибриддештирүүнүн ортосундагы айырма.
In Situ гибриддештирүү жана иммуногистохимиянын PDF версиясын жүктөп алыңыз
Сиз бул макаланын PDF версиясын жүктөп алып, шилтеме эскертүүсүнө ылайык оффлайн максаттарында колдоно аласыз. Сураныч, PDF версиясын бул жерден жүктөп алыңыз In Situ гибриддештирүү менен иммуногистохимиянын айырмасы.
