Негизги айырма – Иммунофлуоресценция менен Иммуногистохимия
Молекулярдык биологиялык ыкмаларды колдонгон ооруларды диагностикалоо клиникалык лабораториялык технологиянын өнүгүп келе жаткан багыты болуп калды. Ал организмдеги ДНКны, РНКны же экспрессивдүү протеиндерди талдоо аркылуу ооруну аныктоо жана оорунун себебин түшүнүү үчүн бардык тесттерди жана ыкмаларды камтыйт. Молекулярдык диагностикадагы тез жетишкендиктер жугуштуу жана жугуштуу эмес оорулар боюнча фундаменталдуу изилдөөлөрдү жүргүзүүгө мүмкүндүк берди. Булар ооруга катышкан маанилүү гендердин же белоктордун ырааттуулугун же экспрессия деңгээлиндеги өзгөрүүлөрдү аныктоо үчүн колдонулат. Иммунофлуоресценция (IF) жана Иммуногистохимия (IHC) рак биологиясында кеңири колдонулган эки ыкма. IF - IHCтин бир түрү, мында флуоресценттик аныктоо ыкмасы моноклондук жана поликлоналдык антителолорду талдоо үчүн колдонулат, ал эми IHC моноклондук жана поликлоналдык антителолорду аныктоо үчүн химиялык ыкмаларды колдонот. Бул IF менен IHC ортосундагы негизги айырма.
Иммунофлуоресценция (Эгер) деген эмне?
Иммунофлуоресценция – бул аныктоо ыкмасы, мында анализде колдонулган антителолор аныктоо максатында флуоресценттик боёкторду же флуоресценттик протеиндерди колдонуу менен белгиленет. Белгиленген экинчилик антителолор керексиз фон сигналдарына алып келиши мүмкүн; ошондуктан, IF техникасы аныктоо учурунда керексиз сигналдарды болтурбоо үчүн учурда негизги антителолордун өзүн белгилөөгө негизделген. Бул ыкма аркылуу, биринчилик жана экинчилик антителолордун ортосунда спецификалык эмес байланыштын алдын алат жана экинчилик инкубация баскычы болбогондуктан тезирээк болот. Дайындардын сапаты да жакшырды.
01-сүрөт: BrdU, NeuN жана GFAP үчүн кош иммунофлуоресценттик боёо
Фторхромдор же флуоресценттик боёктор - нурланууну, жакшыраак ультра кызгылт көк нурланууну сиңире алган кошулмалар. Бөлүкчөлөр дүүлүккөн абалдан негизги абалга жеткенде, алар спектрди түзүү үчүн детектор тарабынан кармалып, аныкталган нурланууну чыгарышат. Флуоресценттик белгинин конкреттүү реакцияга шайкеш жана туруктуу болушу чоң мааниге ээ жана так натыйжаларды алуу үчүн антитело менен туура конъюгацияланышы керек. Эң көп колдонулган флюорохромдордун бири флуоресцеин изотиоцианаты (FITC) болуп саналат, ал жашыл түстө, жутуу жана эмиссиянын эң жогорку толкун узундуктары тиешелүүлүгүнө жараша 490 нм жана 520 нм. Родамин, IFте колдонулган дагы бир агент, кызыл түстө жана 553 нм жана 627 нм болгон сиңирүү жана эмиссиянын эң жогорку толкун узундугуна ээ.
Иммуногистохимия (IHC) деген эмне?
IHC – максаттуу клеткада антигендин бар экендигин аныктоо жана тастыктоо үчүн колдонулган молекулярдык тестирлөө ыкмасы. Максаттуу клетка инфекциялык бөлүкчө, микробдук патоген же залалдуу шишик клеткасы болушу мүмкүн. IHC максаттуу клеткалардын клетка бетинде антигендердин бар экендигин аныктоо үчүн моноклоналдык жана поликлоналдык антителолорду колдонот. Техника антиген менен антитело байланышына негизделген. Белгилүү бир антигендин бар же жок экенин аныктоо үчүн бул антителолорго аныктоо маркери конъюгацияланат. Бул маркерлер ферменттер, флуоресценттик тег коюлган антителолор же радио менен белгиленген антителолор сыяктуу химиялык маркерлер болушу мүмкүн.
02-сүрөт: Иммуногистохимия менен боёлгон чычкан-мээ тили
IHCтин эң популярдуу колдонмосу рак клеткаларынын биологиясында залалдуу шишиктердин бар экендигин аныктоо үчүн, бирок ал жугуштуу ооруларды аныктоо үчүн да колдонулат.
Иммунофлуоресценция менен иммуногистохимиянын кандай окшоштуктары бар?
- Иммунофлуоресценция жана иммуногистохимия in vitro шартында ишке ашат.
- Эки техника тең антиген-антителого негизделген
- Экөө тең абдан тез ыкмалар.
- Техникалардын натыйжалары кайталанат.
- Экөө тең маалымат сапаты жакшыртылды.
- Бул ыкмалар рак жана жугуштуу ооруларды диагностикалоодо колдонулат.
Иммунофлуоресценция менен иммуногистохимиянын ортосунда кандай айырма бар?
Иммунофлуоресценция vs Иммуногистохимия |
|
| IF – аныктоо ыкмасы, мында анализде колдонулган антителолор флуоресценттик боёкторду же флуоресценттик белокторду аныктоо үчүн белгиленет. | IHC - анализде колдонулган антителолор аныктоо үчүн химиялык заттарды же радиоактивдүү элементтерди колдонуу менен белгиленген аныктоо ыкмасы. |
| Тактык | |
| IHCге салыштырмалуу IF техникасында тактык жогору. | IHCде тактык төмөн. |
| Өзгөчөлүк | |
| ЭГЕР тагыраак. | IHC анча так эмес. |
Кыскача маалымат – Иммунофлуоресценция жана Иммуногистохимия
Молекулярдык механизмдер медицина тармагында көптөгөн өзгөрүүлөрдү алып келип, диагностика тармагында революцияларды алып келген алдыңкы молекулярдык тестирлөө ыкмаларын пайда кылды. Бул ойлоп табуулар ооруну тез жана так аныктоого жана тастыктоого алып келди, ошону менен дарыларды ийгиликтүү башкарууга жана өндүрүүгө мүмкүндүк берди. Бул ыкмалар фармакологияда дарылардын максаттарын табуу жана дары-дармектин метаболизминде дары-дармектин фармакокинетикалык касиеттерин ырастоо үчүн да колдонулат. IF жана IHC эки диагностикалык метод болуп саналат, алар антиген менен антитело байланышынын концепциясына негизделген, бирок эки ыкмада тең аныктоо режими айырмаланат. IF антигенди аныктоо үчүн флуоресценция принцибин колдонот, ал эми IHC антигенди аныктоо үчүн химиялык конъюгация түшүнүгүн колдонот. Бул IF менен IHC ортосундагы айырма.
Иммунофлуоресценцияга каршы Иммуногистохимиянын PDF версиясын жүктөп алыңыз
Сиз бул макаланын PDF версиясын жүктөп алып, шилтеме эскертүүсүнө ылайык оффлайн максаттарында колдоно аласыз. Сураныч, PDF версиясын бул жерден жүктөп алыңыз Иммунофлуоресценция менен иммуногистохимиянын айырмасы.
