HPLC менен тез HPLC ортосундагы негизги айырма, биз HPLC үчүн колдонгон насостун басымы болжол менен 40 МПа, ал эми тез HPLC үчүн насостун басымы 3-5 МПанын тегерегинде.
Ашкананын компоненттерин бөлүү үчүн биз колдонгон эң кеңири таралган ыкма бул "суюк хроматография". Бул максатка жетүү үчүн бир нече ыкмалар бар, алардын ичинен HPLC абдан популярдуу. HPLC суюктук аралашмасынын компоненттерин тез жана эффективдүү түрдө аныктаган, санын аныктаган жана бөлүүчү Жогорку натыйжалуу суюк хроматографияны билдирет. Fast HPLC - бул HPLCтин атайын колдонмосу, ал акыркы убакта чечимдерди изилдөөгө катышкандардын көңүлүн бурган.
HPLC деген эмне?
HPLC - бул жогорку натыйжалуу суюк хроматография. Ал эриткичтерди колонка аркылуу өтүшү үчүн түртүү үчүн жогорку басымды колдонот. Ошондой эле, бул аминокислоталар, нуклеиндик кислоталар, углеводдор, стероиддер, антибиотиктер жана углеводороддор сыяктуу ар кандай кошулмаларды бөлүп жана изилдөөнүн идеалдуу жолу. HPLC аралашмаларды бөлүүнүн башка ыкмаларына караганда жогорураак чечим жана тезирээк талдоо сыяктуу көптөгөн артыкчылыктарга ээ. Бул кайра таңгактоо жана регенерациялоо зарылдыгын жокко чыгарат жана параметрлерди жакшыраак көзөмөлдөөнү сунуштайт, демек, бөлүүнүн натыйжалуулугун жогорулатуу. Идеалында, HPLC чоң масштабдагы колдонмолорго ылайыктуу, анткени ал өтө кичинекей бөлүкчөлөрдү бөлүп алат жана эриткичтердин оңой агышын жеңилдеткен жогорку басымды колдонууга мүмкүндүк берет.
01-сүрөт: HPLC мамычасы
Кыскача айтканда, HPLC техникасынын иштөө ыкмасы төмөнкүдөй. Биринчиден, биз үлгүнү мобилдик фазанын агымына насостун жардамы менен дискреттик аз өлчөмдө киргизишибиз керек. Насостун басымы 40 МПа болушу керек. Мобилдик фазанын бул агымы HPLC мамычасы аркылуу өтөт. Андан кийин, үлгүдөгү компоненттер да мамыча аркылуу өтөт. Бирок, алардын кыймыл ылдамдыгы бири-биринен айырмаланып турат, анткени үлгү компоненттери менен колонна ичиндеги адсорбенттин ортосундагы өз ара аракеттешүү айырмасы бар. Бул адсорбентти стационардык фаза деп атайбыз, анткени ал мамычанын ичинде жайгашкан (кыймылсыз). Андан кийин, тилкенин аягында, мамычадан бөлүнүп чыккан үлгүнү чогултуп, ошону менен үлгүдөгү компоненттерди өзүнчө чогулта алабыз.
Fast HPLC деген эмне?
Жакында Schering Plow изилдөө институтунун изилдөөчү окумуштуулары HPLCтин өнүккөн версиясы болгон тез HPLC ыкмасын иштеп чыгышты, анткени ал аралашмадан кошулмаларды тезирээк ажыратууга мүмкүндүк берет. Ошондой эле, тез HPLC катары белгилүү болгон бул ыкма 2,7um эритилген өзөктүү кремнезем бөлүкчөлөрүн колдонот, алар кремний диоксиди катуу бөлүкчөсүнүн үстүнө 0,5um тешиктүү кремнеземди эритүү жолу менен жасалган. Бул уникалдуу түрдө жасалган бөлүкчөлөр бөлүү процедурасын абдан тез жана биз HPLCде колдонгонго караганда төмөн арткы басымда жасайт.
02-сүрөт: FPLC аппараты
Fast HPLC UPLC менен салыштырууга боло турган натыйжаларды алат, бирок илимпоздор бул ыкманы жогору деп эсептешет, анткени ал өтө кымбат өтө жогорку басымдагы жабдууларды талап кылбайт. Эң сонун нерсе, тез HPLC эч кандай жаңы лабораториялык протоколдорду талап кылбайт.
HPLC жана Fast HPLC ортосунда кандай айырма бар?
HPLC - бул жогорку натыйжалуу суюк хроматография жана тез HPLC - бул жогорку натыйжалуу суюк хроматографиянын өнүккөн түрү. HPLC менен тез HPLC ортосундагы негизги айырма, биз HPLC үчүн колдонгон насостун басымы болжол менен 40 МПа. Ал эми тез HPLC үчүн насостун басымы 3-5 МПа тегерегинде. Андан тышкары, HPLC ыкмасы менен аминокислоталар, нуклеиндик кислоталар, углеводдор, стероиддер, антибиотиктер жана углеводороддор сыяктуу ар кандай кошулмаларды ажырата алабыз, ал эми тез HPLC ыкмасы негизинен белокторду бөлүү үчүн колдонулат.
Төмөнкү инфографика HPLC менен тез HPLCтин айырмасы жөнүндө көбүрөөк маалымат берет.
Кыскача – HPLC жана Fast HPLC
HPLC суюк хроматографиянын ыкмасы болуп саналат, ал дүйнө жүзү боюнча абдан популярдуу болуп калды. Fast HPLC бул HPLCтин жаңы версиясы, Шеринг Плоу институтунун изилдөөчүлөрү бул жаңы техниканы иштеп чыгышкан. HPLC менен тез HPLC ортосундагы негизги айырма биз бөлүү үчүн колдонгон насостун басымына байланыштуу. Ушул; HPLC үчүн биз колдонгон насостун басымы болжол менен 40 МПа. Бирок, тез HPLC үчүн насостун басымы болжол менен 3-5 МПа.
