Гель фильтрациясынын жакындык хроматографиясынын негизги айырмасы гель фильтрациялоо хроматографиясы аналиттин үлгүсүнүн молекулалык салмагынын же өлчөмүндөгү айырмачылыктарга көз каранды, ал эми жакындык хроматографиясы аналиттин иммобилизацияланган лигандга жакындыгынан көз каранды.
Аналитикалык химиядагы хроматография термини ар кандай ыкмаларды колдонуу менен аралашмадагы компоненттерди бөлүү процессин билдирет. Хроматография бөлүү үчүн ар кандай ыкмалардын ар кандай санын билдирген жалпы аталыш.
Гель фильтрлөө хроматографиясы деген эмне?
Гел фильтрлөө хроматографиясы – аналитикалык ыкма, анда компоненттерди бөлүү молекулярдык салмактын же чоңдуктун айырмасына көз каранды. Бул ыкма ошондой эле өлчөм-эксклюзия хроматографиясы же молекулярдык-электен хроматография деп аталат. Бул процесстеги бөлүү техникасы үлгүдөгү молекулалардын гел-фильтрациялоочу чөйрөнүн тешиктерине кирүү жөндөмдүүлүгүнө жараша болот.
Гель фильтрациялоо техникасында стационардык фазада молекулярдык өлчөмдөгү тешикчелери бар гидратталган, губка сымал материалдын мончоктору камтылган. Ар түрдүү өлчөмдөгү молекулалардан турган суулуу эритмени ушул «молекулярдык электерди» камтыган колонка аркылуу өткөрсөк, чыпкалоочу чөйрөнүн тешиктеринен чоңураак болгон молекулалар колонка аркылуу тез жылышат. Ал эми, кичинекей молекулалар гелдин тешикчелерине кирип, мамыча аркылуу акырындык менен жылат. Молекулалар молекулярдык чоңдуктун кичирейтүү тартибинде мамычадан элюталанат. Бул жерде гелди алып салуу чеги бул гелдин тешиктеринен өтө албаган эң кичинекей молекулалардын молекулалык массасы.
Гел фильтрациялоо ыкмаларынын ар кандай түрлөрү бар, мисалы, кыйыр гелди чыпкалоо ыкмасы, туруктуу абалдагы гелди чыпкалоо, гел мончогу диализ, ж.б. Кыйыр эмес гел фильтрлөө хроматографиясы калкан безинин гормондорун аныктоодо пайдалуу. Туруктуу абалдагы гел фильтрлөө хроматографиясы – бул негизинен кортизол, тестостерон ж.б. сыяктуу эркин стероиддерди өлчөө үчүн пайдалуу кыйыр ыкма. Гель мончок диализи, экинчи жагынан, туруктуу абалдагы гел фильтрациясынын салыштырмалуу жөнөкөй модификациясы.
Жакындык хроматографиясы деген эмне?
Афиндүүлүк хроматографиясы – аналитикалык ыкма жана иммобилизацияланган лиганд менен анын байланыштыруучу өнөктөшүнүн ортосундагы белгилүү бир байланыштырууга көз каранды болгон бөлүү ыкмасы. Кээ бир мисалдарга антитело-антиген байланышы, фермент-субстрат байланышы жана фермент-ингибитор байланышы кирет. Ошондуктан, бул ыкма нуклеиндик кислоталарды тазалоодо, клетканын экстракттарынан белок тазалоодо жана кандан тазалоодо көптөгөн маанилүү колдонмолорго ээ.
Бул техникада эң маанилүү касиет лиганддарды иммобилизациялоо болуп саналат. Бул үчүн акрилаттар жана силикагель сыяктуу ар кандай материалдарды колдоно алабыз. Бул лигандга максаттуу молекуланын стерикалык кийлигишүүсүн алдын алуу маанилүү. Мындан тышкары, бир ингибитор катуу фазага тиркелет. Биз бул ингибиторду спасер деп атайбыз. Классикалык түрдө бөлгүч көмүртек чынжырынан турат.
Жакындык хроматографиясынын стационардык фазасы өзөктү, спасерди жана лигандды камтыйт. Кээде, ал ошондой эле лиганда менен байланышкан металл ионуна ээ. Бул техниканын стационардык фазасы үчүн эң көп жактырылган катуу фаза агароз гели болуп саналат, анткени ал колонканы каалаган өлчөмдөгү чайыр катмарлары менен толтуруу жана таңгактоо үчүн оңой бөлүштүрүлөт жана биомолекулалардын мончоктордун ичине жана мончоктору аркылуу эркин агып өтүшү үчүн жетиштүү чоң. Лиганддар мончок полимерине ар кандай жолдор менен коваленттүү кошула алат. Эң кеңири таралган спасердик бирикмелер цианоген бромид, эпоксид, С6 кислотасы менен эпоксид жана диамин. Башка жагынан алганда, биз колдоно ала турган лиганд максатка жараша айырмаланат, мис., антитело-антиген, темир же алюминий иондору-фосфопротеиндер, авидин-биотин, глутатион-GST, хелатор-Анын белгиленген белоктору ж.б.
Гель фильтрациясынын жана жакындык хроматографиясынын ортосунда кандай айырма бар?
Хроматография маанилүү аналитикалык ыкма. Гель чыпкалоо хроматографиясы жана жакындык хроматографиясы хроматографиянын эки маанилүү вариациясы болуп саналат. Гель фильтрациясынын жана жакындык хроматографиясынын ортосундагы негизги айырма, гел фильтрация хроматографиясы аналиттин үлгүсүнүн молекулалык салмагынын же өлчөмүндөгү айырмачылыктарга көз каранды, ал эми жакындык хроматографиясы аналиттин иммобилизацияланган лигандга жакындыгынан көз каранды.
Кыскача маалымат – Гель фильтрация жана жакындык хроматография
Алардын колдонулушуна жана анализденүүчү үлгүнүн табиятына жараша хроматографиялык техниканын ар кандай түрлөрү бар. Гель фильтрациясы жана жакындык хроматографиясы техниканын эки түрү. Гель фильтрациясынын жана жакындык хроматографиясынын ортосундагы негизги айырма, гелдик фильтрация хроматографиясы аналиттин үлгүсүнүн молекулалык салмагынын же өлчөмүндөгү айырмачылыктарга көз каранды, ал эми жакындык хроматографиясы аналиттин иммобилизацияланган лигандга жакындыгынан көз каранды.
