Жакындык менен ион алмашуу хроматографиясынын негизги айырмасы - аралашмадагы заряддалган же заряддалбаган компоненттерди бөлүү үчүн жакындык хроматографиясын колдоно алабыз, ал эми аралашмадагы заряддалган компоненттерди бөлүү үчүн ион алмашуу хроматографиясын колдоно алабыз.
Хроматография аралашмадагы керектүү компоненттерди бөлүү үчүн колдоно турган ыкма. Суюк хроматография, газ хроматографиясы жана башкалар сыяктуу ар кандай түрлөрү бар. Жакындык хроматографиясы жана ион алмашуу хроматографиясы суюк хроматографиянын эки подкатегориясы болуп саналат. Ошондой эле, бул ыкмалар, эки этап бар. Тактап айтканда, алар стационардык фаза жана мобилдик фаза болуп саналат. Бул ыкмалардын максаты кыймылдуу фазадагы компоненттердин байланышына жараша компоненттерди стационардык фазанын бетине бөлүү.
Жакындык хроматографиясы деген эмне?
Афиндүүлүк хроматографиясы бул компоненттердин ортосундагы өз ара аракеттенүүгө жараша аралашмадагы компоненттерди бөлүү үчүн колдонгон биохимиялык ыкма.
Бул учурда биз колдонгон өз ара аракеттерге төмөнкүлөр кирет:
- Антиген менен антителолордун өз ара аракеттенүүсү
- Фермент-субстрат өз ара аракеттенүүсү
- Рецептор-лиганддардын өз ара аракеттенүүсү
- Белок-нуклеиндик кислотанын өз ара аракеттешүүсү
Бул техникада биз бул бөлүү техникасы үчүн молекулалардын молекулалык касиеттерин колдонобуз. Бул жерде биз каалаган кошулманы стационардык фаза менен суутек байланышы, иондук өз ара аракеттенүү, дисульфиддик көпүрөлөр, гидрофобдук өз ара аракеттенүү ж. Стационардык фаза менен өз ара аракеттенбеген молекулалар алгач элюта болот. Ошентип, биз аны аралашмадан ажырата алабыз. Керектүү кошулма стационардык фазага тиркелген бойдон калат. Ошондуктан, биз аны элюталоочу эриткичтин жардамы менен ажыратып, аны да бөлүп алуу үчүн элюта кыла алабыз.
01-сүрөт: Хроматографиялык мамыча
Афиндик хроматография буфердик эритмени колдонуу менен аралашмадан затты тазалоодо жана концентрациялоодо пайдалуу. Ошондой эле, бул аралашмадагы керексиз заттарды азайтуу үчүн пайдалуу. Бул процесс үчүн колдонгон аппаратты карап жатканда, биздин стационардык фаза менен толтурулган мамычаны колдонушубуз керек. Андан кийин, биз бөлүп турган биомолекулаларды камтыган мобилдик фазаны жүктөшүбүз керек. Андан кийин, аларга стационардык фаза менен байланышууга мүмкүнчүлүк бериңиз. Андан кийин, жуугуч буферди колдонуп, максаттуу эмес биомолекулаларды ажырата алабыз, бирок бөлүү процесси ийгиликтүү болушу үчүн максаттуу молекулалар стационардык фазага жогорку жакындыкка ээ болушу керек.
Ион алмашуу хроматографиясы деген эмне?
Иондук хроматография - суюк хроматографиянын бир түрү, мында иондук заттарды талдай алабыз. Көбүнчө, биз аны органикалык эмес аниондорду жана катиондорду (мисалы, хлорид жана нитрат аниондору жана калий, натрий катиондору) анализдөө үчүн колдонобуз. Ал азыраак болсо да, биз органикалык иондорду да талдай алабыз. Болгондо да, биз бул ыкманы белокторду тазалоо үчүн колдоно алабыз, анткени белоктор белгилүү рН баалуулуктарында заряддуу молекулалар. Бул жерде биз заряддалган бөлүкчөлөр туташа турган катуу стационардык фазаны колдонобуз. Мисалы, биз чайыр полистирол-дивинилбензол сополимерлерин катуу таяныч катары колдоно алабыз.
02-сүрөт: Ион алмашуу хроматографиясынын фазалары
Муну мындан ары түшүндүрүү үчүн стационардык фазада сульфат аниондору же төртүнчү амин катиондору сыяктуу туруктуу иондор бар. Эгерде биз бул системанын нейтралдуулугун сактай турган болсок, булардын ар бири контрион менен (карама-каршы заряддуу ион) биригиши керек. Бул жерде, эгерде каршы ион катион болсо, анда биз системаны катион алмаштыруучу чайыр деп атайбыз. Бирок, эгерде каршы ион анион болсо, система анион алмаштыруучу чайыр болуп саналат.
Ион алмашуу процессинде беш негизги фаза бар;
- Баштапкы этап
- Максаттын адсорбциясы
- Элюциянын башталышы
- Элюциянын аягы
- Кайра жаралуу
Жакындык жана ион алмашуу хроматографиясынын ортосунда кандай айырма бар?
Афиндик хроматография бул компоненттердин ортосундагы өз ара аракеттенүүгө жараша аралашмадагы компоненттерди бөлүү үчүн колдонгон биохимиялык ыкма, ал эми ион хроматографиясы суюк хроматографиянын бир түрү, анда биз иондук заттарды талдайбыз. Ошондуктан, жакындык менен ион алмашуу хроматографиясынын негизги айырмасы, биз ион алмашуу хроматографиясын иондук заттарды бөлүү үчүн гана колдоно алабыз, ал эми жакындык хроматографиясы заряддалган жана зарядсыз бөлүкчөлөрдү бөлүүгө жөндөмдүү. Иштөө принцибин карап чыгууда, жакындык менен ион алмашуу хроматографиясынын айырмасы, жакындык хроматографиясы максаттуу молекулалар стационардык фазага жогорку жакындыкка ээ болгондугуна байланыштуу жүрөт. Бирок ион алмашуу хроматографиясы үчүн максаттуу молекулалар стационардык фаза бетинин зарядына карама-каршы келет.
Төмөнкү инфографика жакындык менен ион алмашуу хроматографиясынын ортосундагы айырманы жанаша салыштыруу катары көрсөтөт.
Корытынды – Жакындыкка каршы ион алмашуу хроматографиясы
Кыскача айтканда, жакындык жана ион алмашуу хроматографиясы суюк хроматографиялык техниканын эки түрү болуп саналат. Жакындык менен ион алмашуу хроматографиясынын ортосундагы негизги айырма, биз аралашмадагы заряддалган же заряддалбаган компоненттерди бөлүү үчүн жакындык хроматографиясын колдоно алабыз, ал эми аралашмадагы заряддалган компоненттерди бөлүү үчүн ион алмашуу хроматографиясын колдоно алабыз.
