Негизги Айырма – Түз жана Кыйыр ELISA
Ферменттик иммуноанасай (ELISA), ошондой эле ферменттин иммуно анализи катары белгилүү, кандагы антителолорду аныктаган серологиялык тест. Ал оорулууга вирустун тигил же бул түрүнө же башка инфекциялык агентке (антигенге) кабылганын жана организмде инфекцияга каршы антителолордун пайда болгонун аныктоо үчүн диагностикалык курал катары колдонулат. ELISA ошондой эле өткөн жана учурдагы инфекцияларды аныктай алат. Демек, ELISA көбүнчө ооруларды терең талдоодон мурун дарыгерлер тарабынан алдын ала текшерүү тести катары колдонулат. Бул анализди лабораторияда пациенттен кандын үлгүсүн алуу менен жүргүзүүгө болот. ELISA тестинин эки түрү бар: түз ELISA жана кыйыр ELISA. Түз жана кыйыр ELISA ортосундагы негизги айырма кыйыр ELISA көбүрөөк сезгич жана экинчилик антитело кошууну талап кылат, ал эми тике ELISA сезгичтиги азыраак жана негизги антителолорду гана колдонот.
Түз ELISA деген эмне?
ELISA – бул кандагы белгилүү антигендер же антителолордун бар экендигин аныктоо үчүн аткарылуучу оорунун диагностикалык тести. Бул пластиналык анализ катары жүргүзүлөт. Ал оңой анализделген ферменттер менен байланышкан антителолорду колдонот. Антигендердин сыворотканын үлгүсүндө болушу ферменттер менен байланышкан белгилүү антителолор менен байланышат. Акыркы этапта фермент менен реакцияга кирүү үчүн белгилүү бир субстрат кошулат. Фермент субстратты түстүү же сигнал чыгаруучу продуктуга айлантат. Химиялык субстраттын түсүнүн өзгөрүшү сыворотка үлгүсүндө белгилүү бир антитело бар экендигин көрсөтөт. Түз ELISA тести ферментке байланышкан негизги антителолорду гана колдонот. Антиген менен байланышкандан кийин ал тез эле түсүн өзгөртөт, бул канда инфекциялык агенттин бар экенин көрсөтөт. Бирок, сигналдардын интенсивдүүлүгү түздөн-түз ELISAда алсызыраак, анткени эпитоптор антигендердин байланышы менен чектелет. Демек, түз ELISA кыйыр ELISAга салыштырмалуу азыраак сезгич.
01-сүрөт: Түздөн-түз ELISA тести
Кыйыр ELISA деген эмне?
ELISA антителолордун эки түрүн колдонуу менен жүргүзүлүшү мүмкүн, атап айтканда; негизги антитело жана экинчилик антитело. Кыйыр ELISA куралы жакшыраак аныктоо үчүн сигналдарды күчөтүү үчүн антителолордун эки түрүн колдонот. Кыйыр ELISA ыкмасы төмөнкүдөй аткарылат.
- Плиталар антигендер менен инкубацияланат жана спецификалык эмес байланышты бөгөттөө үчүн жуулат.
- Андан кийин негизги антителолор кошулуп, жуулат.
- Фермент менен байланышкан экинчилик антитело кошулуп, жуулат.
- Субстрат кошулуп, ферменттер менен реакцияга киришет.
- Сигналдар аныкталып, үлгүдөгү спецификалык антигендин бар же жок экендиги аныкталат.
Кыйыр ELISA тестинде бир нече экинчилик антитело бир негизги антитело менен байланыша алат. Экинчилик антителолор оңой анализденген ферменттер менен байланышкан. Ошондуктан, бир байлоо бир нече өз ара аракеттенүүнүн натыйжасында күчтүү сигнал бере алат. Демек, кыйыр ELISA түз ELISA караганда сезгич болуп саналат. Бирок кыйыр ELISA экинчилик антителолордун кайчылаш реакцияларынан улам спецификалык эмес сигналдарды жасай алат.
02-сүрөт: Кыйыр ELISA тести
Түз жана кыйыр ELISA ортосунда кандай айырма бар?
Түз жана Кыйыр ELISA |
|
| Түз ELISA кыйыр ELISAга салыштырмалуу азыраак сезгич. | Кыйыр ELISA сезгич. |
| Алынган убакыт | |
| Түз ELISA тести – бул тез процесс. | Кыйыр ELISA көп убакытты талап кылат. |
| Антителолорду колдонуу | |
| Антителолордун бир гана түрү (Негизги антителолор) тике ИФАда колдонулат. | Биринчи жана экинчилик антителолор кыйыр ELISA үчүн колдонулат. |
| Ферменттер менен байланыш | |
| Негизги антителолор ферменттер менен байланышкан. | Экинчи даражадагы антителолор ферменттер менен байланышкан. |
| Экинчи антителолордун кайчылаш реакциясы | |
| Түз ELISA экинчи антителолордун кайчылаш реакциясын жок кылат. | Кыйыр эмес ELISA экинчи антителолордун кайчылаш реактивдүүлүгүнө таасир этет. |
| Сигналдар | |
| Сигналдар кыйыр ELISAга салыштырмалуу начар. | Сигналдар кыйыр ELISAда күчөтүлөт. Демек, аны аныктоо оңой. |
Кыскача – Түз жана Кыйыр ELISA
ELISA – пациенттин кан үлгүсүндө антитело же антиген бар экендигин аныктоо үчүн негизинен иммунологияда колдонулган биохимиялык ыкма. Бул түз же кыйыр ELISA деп аталган эки жараян аркылуу жүзөгө ашырылышы мүмкүн. Түз ELISA тести антигенди аныктоо үчүн негизги антителолорду гана колдонот, ал эми кыйыр ELISA негизги жана экинчилик антителолорду колдонот. Түз ELISAда негизги антителолор белгиленет, ал эми кыйыр ELISAда экинчилик антителолор белгиленет. Бул түз жана кыйыр ELISA ортосундагы айырма.
