Негизги айырма – Грам менен боёк менен кислота тез
Бактериялар өтө майда микроорганизмдер. Алар ачык-айкын жана аларды аныктоо жашоо жана булганбаган шарттарда кыйынга турат. Ошентип, бактерияларды аныктоону жеңилдетүү үчүн ар кандай боёо ыкмалары иштелип чыккан. Боёктун үч негизги түрү бар: жөнөкөй боёо, дифференциалдык боёо жана структуралык боёо. Дифференциалдык боёо - бул бактерияларды айырмалоо үчүн бирден ашык боёкту колдонгон ыкма. Грамдык боёк жана кислотага туруктуу боёк көбүнчө дифференциалдык боёк катары белгилүү. Грам менен боёо бактерияларды Грам-оң бактериялар жана Грам-терс бактериялар деп аталган эки топко бөлгөн дифференциалдык боёо ыкмасы. Кислотага туруктуу боек кычкылга тез эмес организмдерден микобактерия сыяктуу кислотага тез организмдерди аныктоо үчүн колдонулган дифференциалдык боёк. Бул Грамдагы боёк менен кислота тез богонун ортосундагы негизги айырма.
Грамдагы так деген эмне?
Грам боёгу микробиологияда бактерияларды идентификациялоо үчүн колдонулган маанилүү дифференциалдуу боёо ыкмасы. Бул ыкманы даниялык бактериолог Ганс Кристиан Грам 1884-жылы киргизген. Грам менен боёо бактерияларды грам оң жана грам терс деп аталган эки чоң топко бөлөт, алар бактерияларды классификациялоодо жана идентификациялоодо абдан маанилүү. Микробиологдор изилдөө учурунда бактерияларды аныктоонун алгачкы кадамы катары грамм менен боёшот.
Бактериялар клетка дубалындагы айырмачылыктарга жараша топторго бөлүнөт. Грам оң бактериялар клетка дубалындагы калың пептидогликан катмарынан турат, ал эми грамм терс бактериялар клетка дубалындагы жука пептидогликан катмарынан турат. Грам менен боёонун натыйжасы клетка дубалынын пептидогликан катмарынын калыңдыгынын айырмасына негизделет.
Грам менен боёо төрт түрдүү реагенттин жардамы менен жүргүзүлөт, атап айтканда; негизги боек, мордант, деcolorizing агент жана каршы тагы. Кристалл фиолет жана сафранин негизги жана каршы тактар катары колдонулат, тиешелүүлүгүнө жараша грамм йод жана 95% спирт мордант жана деcolourizer катары колдонулат. Грам менен боёонун негизги кадамдары төмөнкүдөй;
- Бактериялык мазок таза айнек слайдга даярдалат, ысыкта бекитилет жана муздатылат.
- Мак 1 – 2 мүнөткө кристалл кызгылт көк менен капталган.
- Мак ашыкча тактарды кетирүү үчүн жай агып жаткан кран суусу менен чайкалат.
- Грам йод мазокко 1 мүнөт сүйкөүлөт.
- Мак жай агып жаткан крандагы суу менен чайкалат
- Мак 95% спирт менен 2 – 5 секундга жуулат жана жай агып жаткан крандагы суу менен чайкалат.
- Мак 1 мүнөткө сафранин менен боёлот
- Мак жай агып жаткан крандагы суу менен чайкалат, кургатылат жана микроскоп астында байкалат.
Грамдык тактын аягында грамм терс бактериялар кызгылт түстө, ал эми грамм оң бактериялар кызгылт көк түстө байкалат.
01-сүрөт: Грам терс жана грам оң бактерия
Грамдык боёктун натыйжасы алардын клетка дубалындагы пептидогликан катмарынын калыңдыгы менен аныкталат. Деколоризация баскычында алгачкы так жана мордант грам-терс бактериялардан оңой чыгарылат жана алар жука пептидогликан катмарына ээ болгондуктан, түссүз болуп калат. Негизги боек грамм оң бактерияларда сакталат, анткени аларда калың пептидогликан катмары бар. Эсептөөчү боек грам-оң бактериялар үчүн эффективдүү болбойт, анткени негизги так сакталган. Ошентип, грамм оң бактериялар негизги так түстө, башкача айтканда, кызгылт көк түстө көрүнөт. Каршы так грамм терс бактерияларды боёйт жана алар сафранин түсү болгон тандоо түсүндө көрүнөт. Демек, бактерияларды грамм боюнча эки топко бөлүү оңой жана ал бактерияларды дифференциялоодо жана идентификациялоодо баалуу.
Кислота тез деген эмне?
Кислотага туруктуулук – бул кээ бир бактериялардын физикалык касиети, өзгөчө алардын боёо процедураларында кислоталар менен түссүздүрүүгө туруктуулугу. Боёлгондон кийин, бул организмдер суюлтулган кислотага жана же этанолдун негизиндеги түссүздандыруу процедураларына туруштук беришет. Ошентип, бул организмдерге "кислота тез" деген ат берилген. Бул касиет алардын клетка дубалдарында мом сымал материалдын (миколдук кислоталар) жогору болушунан улам көрсөтүлөт. Бул тест кургак учук микобактериясын аныктоо үчүн өтө маанилүү.
2-сүрөт: Кислота тез микобактериялар
Бул кычкылга тез тагы 1882-жылы Пол Эрлих тарабынан иштелип чыккан. Эрлихтин кислотага тез сиңирүү ыкмасын Зихл-Нилсен өзгөрткөн жана ал азыр көбүрөөк колдонулат. Кислота тез боёо процедурасы үч түрдүү реагентти камтыйт. Карбол fuschin негизги боек катары колдонулат. Кислота спирти түстөрдү жок кылуучу агент катары колдонулат. Метилен көк каршы так катары колдонулат. Боёо процедурасы төмөнкүдөй аткарылат.
- Негизги боек (карбол фуксин) слайддагы бекитилген үлгүгө колдонулат (Бардык клеткалар кызыл түскө боёлот).
- Слайд 5 мүнөт бууга бышырып ысытылат, бул тактарды клеткаларга туура түшүрөт.
- Андан кийин түстү жок кылуучу эритме кошулат (Бул кычкылга тез бактериялардан башка бардык клеткалардан кызыл боёкту кетирет).
- Метилен көк түскө каршы боек катары кошулат (Ал бардык түссүздүргөн бактерия клеткаларын боёйт).
- Кислота тез бактериялар кызыл бойдон калат, ал эми кычкылсыз бактериялар көк түскө боёлот.
Грамдагы боёк менен кычкылдыктын кандай окшоштуктары бар?
- Грам менен боёо жана кислота тез - эки дифференциалдуу боёо ыкмасы.
- Эки ыкма тең бактерияларды эки топко бөлөт.
- Экөө тең эки такты жана бир түстү тазалоону колдонот.
Грам менен боёктун тез кислотасынын ортосунда кандай айырма бар?
Грамдагы боёкка каршы кислота тез |
|
| Грам менен боёо - бул бактерияларды Грам-оң бактериялар жана Грам-терс бактериялар деп эки топко бөлгөн дифференциалдык боёо ыкмасы. | Кислотага тез боек - бул кычкылга тез организмдерди кислотага тез эмес организмдерден аныктоо үчүн колдонулган дифференциалдык боё. |
| Негизги тагы | |
| Кристалл фиолет грамм менен боёодо көбүнчө колдонулган негизги боек. | Карбол фуксин - тез кислотада колдонулган негизги боек. |
| Түстү кетирүүчү агент | |
| 95% спирт грамдагы түстү кетирүүчү каражат катары колдонулат. | Кислота спирти тез кислотада түстү кетирүүчү каражат катары колдонулат. |
| Эсептөөчү так | |
| Грамдык тагы каршы боек катары сафранинди колдонот. | Кислота тез тагы каршы боек катары метилен көкүн колдонот. |
| Байкоо | |
| Грам терс бактериялар түстө, ал эми грамм оң бактериялар кызгылт көк түстө байкалат. | Кычкылга тез бактериялар кызыл түстө, ал эми көк түстө кислота эмес бактериялар байкалат. |
Кыскача маалымат – Грамдагы боёкка каршы кислота тез
Микроорганизмдерди тирүү абалында көрүү кыйын. Ошондуктан, алардын касиеттерин изилдөө үчүн биологиялык тактар жана боёо процедуралары кеңири колдонулат. Дифференциалдык боёо - бактерияларды айырмалоо үчүн колдонулган боёо ыкмасынын бир түрү. Грам боёгу жана кислота тез боёо эки дифференциалдуу боёо ыкмалары болуп саналат. Грам менен боёо грам терс бактериялар менен грамм оң бактерияларды клетка дубалынын калыңдыгына жараша айырмалайт. Кислота тез боёо кислотага тез бактерияларды кычкыл эмес бактериялардан клетка дубалындагы миколикалык кислотанын курамына жараша айырмалайт. Бул тез кислота менен граммдык тактын ортосундагы айырма.
Gram Stain vs Acid Fastтин PDF версиясын жүктөп алыңыз
Сиз бул макаланын PDF версиясын жүктөп алып, шилтеме эскертүүсүнө ылайык оффлайн максаттарында колдоно аласыз. Сураныч, PDF версиясын бул жерден жүктөңүз. Gram Stain жана Acid Fast ортосундагы айырма.
