Негизги айырмасы – Грам Стейн менен Маданият
Грам менен боёо – бул бактерияларды клетка дубалындагы пептидогликан катмарынын калыңдыгына жараша эки топко бөлүү үчүн жасалган боёо ыкмасы. Маданият - ар кандай анализ жүргүзүү үчүн лабораториялык шарттарда микроорганизмдерди өстүрүү жана сактоо ыкмасы. грамм тагы жана маданият ортосундагы негизги айырма, алардын милдети болуп саналат; грамм штамм бактерияларды боёо ыкмасы, мында маданият микроорганизмдерди өстүрүү жана сактоо ыкмасы болуп саналат.
Грамдагы так деген эмне?
Грам боёгу микробиологияда бактерияларды идентификациялоо үчүн колдонулган маанилүү дифференциалдык боёо ыкмасы. Бул ыкманы даниялык бактериолог Ганс Кристиан Грам 1884-жылы киргизген. Грам менен боёо бактерияларды эки чоң топко бөлөт: грамм оң жана грамм терс; булар бактерияларды классификациялоодо жана идентификациялоодо абдан маанилүү. Грам менен боёо бактерияларды аныктоо үчүн баштапкы кадам катары жүргүзүлөт.
Бактериялар клетка дубалындагы айырмачылыктарга жараша топторго бөлүнөт. Грам оң бактериялардын клетка капталында калың пептидогликан катмары бар, ал эми грамм терс бактериялардын клетка дубалында 01-сүрөттө көрсөтүлгөндөй ичке пептидогликан катмары бар. Грам менен боёонун натыйжасы пептидогликан катмарынын калыңдык айырмасына негизделет. клетка дубалы.
1-сүрөт: Грам оң бактериялар жана грамм терс бактериялар
Грам менен боёо төрт түрдүү реагенттин жардамы менен жүргүзүлөт, атап айтканда; негизги боек, мордант, деcolorizing агент жана каршы тагы. Кристалл фиолет жана сафранин тиешелүүлүгүнө жараша негизги жана каршы тактар катары кызмат кылат, ал эми йод граммы жана 95% спирт мордант жана түстү тазалоочу болуп кызмат кылат.
Грам менен боёонун негизги кадамдары
- Бактериялык мазок таза айнек слайдга даярдалат, ысыкта бекитилет жана муздатылат.
- Мак 1 – 2 мүнөткө кристалл кызгылт көк менен капталган.
- Мак ашыкча тактарды кетирүү үчүн жай агып жаткан кран суусу менен чайкалат.
- Грам йод мазокко 1 мүнөт сүйкөүлөт.
- Мак жай агып жаткан крандагы суу менен чайкалат
- Мак 95% спирт менен 2 – 5 секундга жуулат жана жай агып жаткан крандагы суу менен чайкалат.
- Мак 1 мүнөткө сафранин менен боёлот
- Мак жай агып жаткан крандагы суу менен чайкалат, кургатылат жана микроскоп астында байкалат.
Грамдык тактын аягында грамм терс бактериялар кызгылт түстө, ал эми грамм оң бактериялар кызгылт көк түстө 02-сүрөттө көрсөтүлгөндөй байкалат. Грамдык тактын жыйынтыгы калыңдык менен аныкталат. алардын клетка дубалындагы пептидогликан катмарынын. Деколоризация баскычында алгачкы так жана мордант грам-терс бактериялардан оңой чыгарылат жана алар жука пептидогликан катмарына ээ болгондуктан, түссүз болуп калат. Негизги боек грамм оң бактерияларда сакталат, анткени аларда калың пептидогликан катмары бар. Негизги такты кармап калуудан улам, грам оң бактериялар үчүн каршы боек эффективдүү болбойт. Ошентип, грамм оң бактериялар негизги так түстө, башкача айтканда, кызгылт көк түстө көрүнөт. Карама-каршы так грамм терс бактерияларды боёйт жана сафранин түсү болгон тандоо түсүндө көрүнөт. Демек, бактерияларды грамм боёгу боюнча эки топко бөлүү оңой жана бактериялык дифференциацияда жана идентификацияда баалуу.
2-сүрөт: Грам штаммы
Маданият деген эмне?
Микробдук культура - ар кандай максаттар үчүн лабораториялык шарттарда микроорганизмдерди өстүрүү жана сактоо ыкмасы. Культуралар микроорганизмдерди өстүрүүнүн түрүнө жана максатына жараша катуу, жарым катуу жана суюк чөйрөдө өстүрүлөт. Маданияттар керектүү азыктар жана микроорганизмдер талап кылган өсүү шарттары менен камсыз кылынат. Маданият чөйрөсүндө энергия булагы, көмүртек булагы, азот булагы, минералдар, микроэлементтер, суу, катуулоочу агент ж.б. сыяктуу ар кандай компоненттер бар. Оптималдуу температура, кычкылтек жана рН өстүрүлгөн микроорганизмдин түрүнө жараша жөнгө салынышы керек.
Микробдук культуралардын ар кандай түрлөрү бар; мисалы, партия культурасы, үзгүлтүксүз культура, бычак маданияты, агар табак маданияты, сорпонун маданияты ж.б. Өсүп жаткан чөйрөнүн курамына ылайык, синтетикалык, жарым синтетикалык жана табигый медиа деп аталган маданий медианын ар кандай түрлөрү бар. Микробдук культуралар ламинардуу аба агымы деп аталган атайын камеранын ичинде стерилдүү шарттарда даярдалат. Өстүрүүчү чөйрө жана айнек идиш керектүү микроорганизмди эмдөө алдында стерилизацияланат. Тиешелүү стерилдүү шарттарда максаттуу микроорганизм стерилденген азык чөйрөсүнө өткөрүлүп берилет жана оптималдуу температурада инкубацияланат. Бул чөйрөнүн ичинде микроорганизмдер берилген азыктарды колдонуу менен өсүп, көбөйөт.
3-сүрөт: Пластинадагы бактериялык культура
Грам менен Стейндин ортосунда кандай айырма бар?
Gram Stain vs Culture |
|
| Грам штамм - бактерияларды дифференциациялоо жана идентификациялоо үчүн колдонулган дифференциалдык боёо ыкмасы. | Микробдук маданият лабораторияда микроорганизмдерди өстүрүүнүн ыкмасы. |
| Компоненттер | |
| Бул ар кандай реагенттерди, анын ичинде эки такты колдонот. | Мында азыктандыруучу заттардан жана башка зарыл шарттардан турган катуу, жарым катуу жана суюк чөйрө сыяктуу ар кандай маданият каражаттары колдонулат. |
| Негизги функциялар | |
| Бул бактерияларды эки топко топтоого мүмкүндүк берет: грамм терс жана грамм оң. | Бул ар кандай максаттар үчүн микроорганизмдердин көбөйүшүнө мүмкүндүк берет. |
| База | |
| Грам менен боёонун натыйжасы клетка дубалынын пептидогликан катмарындагы айырмачылыктарга негизделген. | Микроорганизмдер маданият медиасында өсүп, көбөйөт. |
| Натыйжа | |
| Грамм терс бактериялар кызгылт түстө жана грамм оң бактериялар кызгылт түстө көрүнөт. | Плиталарда микроорганизмдердин колонияларын көрүүгө болот. Суюк чөйрөдө микроорганизмдер суспензия түрүндө болот. |
Кыскача маалымат – Грам Стейн менен Маданият
Микробдук культуралар лабораториялык шарттарда сактоо, сыноо, химиялык тазалоо ж.б. сыяктуу ар кандай максаттар үчүн даярдалат жана сакталат. Грам менен боёо – бул бактерияларды грамм терс бактериялар жана грамм оң бактериялар деп аталган эки негизги топко бөлүүчү боёо процедурасы. Демек, граммдык боёк менен маданияттын ортосундагы айырмачылык, грамм боёгу бактерияларды боёо ыкмасы, ал эми маданият лабораторияларда микроорганизмдерди өстүрүү жана сактоо ыкмасы болуп саналат.
