HEK293 менен HEK293t ортосундагы негизги айырма, HEK293 адамдын эмбриондук бөйрөгүнөн алынган өлбөстөн калган клетка линиясы болуп саналат, ал кыркылган адамдын аденовирус 5ДНКсы менен трансфекцияланган, ал эми HEK293t HEK293 баштапкы клетка линиясынан алынган кыз клетка линиясы. SV40 репликациясынын келип чыгышын алып жүргөн плазмиддик вектор менен трансфекцияланган.
Трансфекция, адатта, алардын генотипине жана фенотипине таасир этүү үчүн клеткаларга чет өлкөлүк ДНК менен РНКны киргизүү процесси катары аныкталат. Чет өлкөлүк нуклеиндик кислоталарды ар кандай биологиялык, химиялык жана физикалык ыкмалар менен мындай киргизүү клетканын касиеттерин өзгөртө алат. Акыр-аягы, бул клетканын контекстинде гендин функциясын жана белоктун экспрессиясын изилдөөгө мүмкүндүк берет. HEK293 жана HEK293t эки клетка линиясы, алар трансфекцияга жакын болгондуктан көп жылдар бою клетка биологиясын изилдөөдө кеңири колдонулган.
HEK293 деген эмне?
HEK293 – адамдын эмбриондук бөйрөгүнөн алынган өлбөстөн калган клетка линиясы, ал кесилген адам аденовирус 5ДНКсы менен трансфекцияланып, көптөгөн рекомбинантты протеиндерди пайда кылат. HEK293s алгач 1973-жылы голландиялык биолог Алекс Ван дер Эб тарабынан адамдын бөйрөк клеткаларынан бөлүнүп алынган. Бул клеткалар ургаачы түйүлдүктөн кыртыш маданиятында өстүрүлгөн. Кийинчерээк алар Ван дер Эбдин лабораториясында докторантуранын кызматкери Фрэнк Грэм тарабынан кыркылган адамдын аденовирусунун 5ДНКсы менен трансфекцияланган. Бул уяча сабы HEK293 деп аталды, анткени ал Фрэнктин 293rd эксперименти.
01-сүрөт: HEK293
Аденовирустук гендердин HEK клеткасынын геномуна кошулушу бул клеткаларга рекомбинантты протеиндердин көп санда өндүрүмдүүлүгүн камсыз кылат. Мындан тышкары, аденовирустук вектор CMV промоутер аймагын камтыйт; демек, бул натыйжалуулукту дагы жогорулатат. Бул клетка линиясы ген экспрессиясын изилдөө үчүн хост катары колдонулган. Бул клетка линиясы биотехнология тармагында ген терапиясы үчүн терапиялык протеиндерди өндүрүү үчүн да колдонулат.
HEK293t деген эмне?
HEK293t – HEK293 баштапкы клетка линиясынан алынган, рекомбинантты протеиндердин жогорку көлөмүн өндүрүү үчүн репликациянын SV40 келип чыгышын алып жүрүүчү плазмиддик вектор менен трансфекцияланган кыз клетка линиясы. HEK293t – бул SV40 чоң Т антигенинин мутанттык версиясын билдирген адамдын клетка линиясы. HEK293t Микеле Карлостун Стэнфорддогу лабораториясында HEK29E клетка линиясын SV40 чоң Т антигенинин температурага сезгич мутант коддоочу плазмид менен туруктуу трансфекциялоо аркылуу түзүлгөн. Ал башында 293/tsA1609neo деп аталган. Себеби трансфекция неомицинге туруктуулукту жана SV40 чоң Т антигенинин tsA 1609 аллелин экспрессиялоочу клетка линиясын түзүү үчүн колдонулат.
02-сүрөт: HEK293t
SV40 чоң Т антигенинин мутанттык версиясынын экспрессиясынан улам, репликациянын SV 40 келип чыгышы менен трансфекцияланган плазмиддер рекомбинантты протеиндин көлөмүн абдан көбөйтө алат. Бул клетка линиясы көбүнчө биотехнология тармагында протеинди экспрессиялоо жана рекомбинантты ретровирустарды өндүрүү үчүн колдонулат.
HEK293 жана HEK293t ортосунда кандай окшоштуктар бар?
- HEK293 жана HEK293t - трансфекцияга ыкташкандыктан клетка биологиясын изилдөөдө кеңири колдонулган эки клетка линиясы.
- Эки клетка линиясы тең лабораториядан алынган.
- Бул клетка линиялары рекомбинантты протеин өндүрүшүнүн көлөмүн бир топ көбөйтө алат.
- Алар адамдын эмбриондук бөйрөк клеткаларын плазмиддик вектор менен трансфекциялоо аркылуу жасалат.
HEK293 менен HEK293t ортосунда кандай айырма бар?
HEK293 - адамдын эмбриондук бөйрөгүнөн алынган өлбөстөн калган клетка линиясы, ал кыркылган адамдын аденовирус 5ДНК түрү менен трансфекцияланган. Ал эми, HEK293t репликациянын SV40 келип чыгышын алып жүрүүчү плазмиддик вектор менен трансфекцияланган HEK293 баштапкы клетка линиясынан алынган кыз клетка линиясы. Ошентип, бул HEK293 жана HEK293t ортосундагы негизги айырма. Андан тышкары, HEK293 SV40 чоң Т антигенинин мутанттык версиясын билдирбейт. Башка жагынан алганда, HEK293t SV40 чоң Т антигенинин мутанттык версиясын билдирет.
Төмөнкү инфографикада HEK293 менен HEK293t ортосундагы айырмачылыктар жанаша салыштыруу үчүн таблица түрүндө келтирилген.
Кыскача – HEK293 vs HEK293t
HEK293 жана HEK293t эки клетка линиясы, анткени алардын туруктуу өсүшү жана трансфекцияга ыктуулугу үчүн клетка биологиясын изилдөөдө кеңири колдонулган. HEK293 - адамдын эмбриондук бөйрөгүнөн алынган, 5ДНКнын кыркылган аденовирусу менен, ал эми HEK293t - SV40 репликациясынын келип чыгышын алып жүрүүчү плазмиддик вектор менен трансфекцияланган HEK293 баштапкы клетка линиясынан алынган кыз клетка линиясы. Ошентип, бул HEK293 менен HEK293t ортосундагы айырманы жыйынтыктайт.
