Иммунопреципитация менен коиммунопреципитациянын негизги айырмасы, иммунопреципитация белгилүү бир антитело аркылуу эритмеден белокту тундуруучу ыкма, ал эми коиммунопреципитация белгилүү бир антитело аркылуу эритмеден бүтүн протеин комплекстерин тундуруучу ыкма.
Антиген-антитело өз ара аракеттенүүсү – бул иммундук реакция учурунда В клеткалары менен антигендер (белоктар) тарабынан өндүрүлгөн антителолордун ортосундагы белгилүү бир химиялык өз ара аракеттенүү. Адатта, эрүүчү антигендер эрүүчү температурада жана рНда электролиттин катышуусунда эрүүчү антителолор менен биригип, эрибеген көрүнүүчү комплексти түзүшөт. Бул жаан-чачын реакциясы деп аталат. Демек, иммунопреципитация жана коиммунопреципитация - бул антигендер сыяктуу протеиндерди аныктоо үчүн лабораторияларда кадимкидей колдонулган преципитация реакцияларынын эки түрү.
Иммунопреципитация деген эмне?
Иммунопреципитация – белгилүү бир антитело аркылуу протеинди эритмеден тундуруп алуу ыкмасы. Кээде, бул ыкма, ошондой эле жеке белок иммунопреципитациясы катары белгилүү. Иммунопреципитация клетка лизатынан тандалган протеинди бөлүп алуу үчүн антитело колдонот. Антитело өзүнүн атайын максаттуу протеинди же антигенди аралашмадан тазалайт. Антитело белок менен байланышат жана антитело-антиген комплекси үлгүдөн чыгарылат. Эксперименттик орнотууда антиген-антитело комплекси протеин A/G кошулган агароза же магниттик мончоктордун жардамы менен чыгарылат. Кийинчерээк мончокторду жууп, кызыктырган протеин элюталанат. Иммунопреципитация аркылуу алынган тазаланган протеин же антиген ферментке байланышкан иммуносорбент анализи (ELISA) жана вестерн блот (ВБ) сыяктуу ар кандай ыкмалар менен текшерилет.
01-сүрөт: Иммунопреципитация
Мындан тышкары, обочолонгон протеиндерди же антигендерди сандык аныктоого жана баштапкы ырааттуулукка негизделген ферменттик сиңирүү схемаларын колдонуу менен масс-спектрометрия аркылуу аныктоого болот. Иммунопреципитациялык экспериментти баштоодон мурун кээ бир ойлор бар: ыкма форматын тандоо, протеиндерди жана мончокторду байланыштыруу, туура негизги антитело менен изотипти тандоо жана терс көзөмөл.
Коиммунопреципитация деген эмне?
Коиммунопреципитация – бул белгилүү бир антитело аркылуу эритмеден бүтүн белок комплекстерин туташтыруу ыкмасы. Коиммунопреципитация көбүнчө белоктордун чоңураак комплексинин мүчөсү деп эсептелген белгилүү протеинге (антигенге) багытталган белгилүү бир антителону тандоо менен иштейт. Белгилүү мүчөнү белгилүү бир антитело менен бутага алуу менен, бүт протеин комплексин эритмеден чыгарууга болот. Бул комплекстин белгисиз мүчөлөрүн аныктоого мүмкүндүк берет. Протеиндик комплекстерди эритмеден чыгаруу түшүнүгү кээде "ылдый түшүрүү" механизми деп аталат.
02-сүрөт: B Коиммунопреципитация
Коиммунопреципитация - белок-белок өз ара аракеттенүүсүн талдоо үчүн колдонулган күчтүү ыкма. Коиммунопреципитациянын негизги максаты - кызыккан протеинге лиганддар, кофакторлор же сигнал берүүчү молекулалар сыяктуу өз ара аракеттенүүчү өнөктөштөрдү аныктоо. Мындан тышкары, coimmunoprecipitation белокторду сары суудан, клетка лизатынан, гомогенизацияланган кыртыштан же шарттуу медиадан бөлүү үчүн колдонулган эффективдүү ыкма.
Иммунопреципитация менен Коиммунопреципитациянын кандай окшоштуктары бар?
- Иммунопреципитация жана коиммунопреципитация - бул жаан-чачынга реакцияга негизделген ыкмалардын эки түрү.
- Эки ыкма тең максаттуу антигенди белгилүү бир антитело аркылуу аныктоо үчүн колдонулушу мүмкүн.
- Эки техника тең антиген менен антителолордун өз ара аракеттенүүсүнөн көз каранды.
- Алар адатта клиникалык лабораторияларда колдонулат.
Иммунопреципитация менен Коиммунопреципитациянын ортосунда кандай айырма бар?
Иммунопреципитация – бул белгилүү бир антитело аркылуу протеинди эритмеден чыгаруу ыкмасы, ал эми коиммунопреципитация – белгилүү бир антитело аркылуу эритмеден бүтүн протеиндик комплекстерди тундуруучу ыкма. Ошентип, бул иммунопреципитация жана coimmunoprecipitation ортосундагы негизги айырма. Андан тышкары, иммунопреципитация көбүнчө лабораторияларда колдонулат, ал эми коиммунопреципитация лабораторияларда кеңири колдонулбайт.
Төмөнкү инфографикада иммунопреципитация менен коиммунопреципитациянын ортосундагы айырмачылыктар жанаша салыштыруу үчүн таблица түрүндө берилген.
Кыскача маалымат – Иммунопреципитация жана Коиммунопреципитация
Иммунопреципитация жана коиммунопреципитация - антиген менен антителолордун өз ара аракеттенүүсүнө көз каранды болгон преципитация реакциясына негизделген ыкмалардын эки түрү. Иммунопреципитация ыкмасы белгилүү бир антитело аркылуу протеинди эритмеден чыгарат, ал эми коиммунопреципитация техникасы белгилүү бир антитело аркылуу эритмеден бүтүн протеиндик комплекстерди туташтырат. Демек, бул иммунопреципитация менен коиммунопреципитациянын ортосундагы айырманы жалпылайт.
