Трансформацияга каршы трансфекция
Трансформация жана трансфекция – бул жат генди кабыл алуучу клеткага киргизүү үчүн колдонулган эки жөнөкөй ыкма. Бирок, бул ыкмалар хосттун же вектордук системалардын түрүнө жараша болот.
Клетка трансформациясы деген эмне?
Трансформация ачыткы жана бактерия клеткаларына гендерди киргизүү үчүн колдонулган ыкма. Бул ыкма, адатта, гендерде тукум куума өзгөрүүлөрдү пайда кылат, ошондуктан гендин экспрессиясы туруктуу болот. Бактериялык трансформация биринчи жолу 1928-жылы Фредерик Гриффит тарабынан киргизилген. Андан кийин 1970-жылдардын башында бул ыкма Э.coli. E. coli трансформация процессинде клеткалар CaCl2 муздай муздак эритмеге чыланган. Бул кадам E.coli клеткаларын компетенттүү кылат. Андан кийин компетенттүү клеткалар плазмиддик ДНК менен аралашып, 20-30 мүнөт музда инкубацияланат. Андан кийин ДНКнын клеткага өтүшүн камсыз кылуу үчүн кыска жылуулук шок берилет. Акыр-аягы, клеткалар аш болумдуу сорпого жайгаштырылат жана плазмиддерди түзүү үчүн 37 ° C 60-90 мүнөт инкубацияланат. Бул кадамдар ийгиликтүү аяктагандан кийин, трансформацияланган клеткалар клеткалардын көбөйүшү үчүн ылайыктуу чөйрөгө жайгаштырылышы мүмкүн. Трансформация эффективдүү эмес ыкма катары эсептелгендиктен, аны клондук банктарды даярдоо үчүн колдонууга болбойт.
Клетка трансфекциясы деген эмне?
Трансфекция – бул жат генди, адатта, сүт эмүүчүлөрдүн клеткаларына киргизүү ыкмасы. Трансфекциянын эки ыкмасы бар; атап айтканда, убактылуу трансфекция жана туруктуу трансфекция. Убактылуу трансфекцияда ген экспрессиясы чектелген убакытка жеткиликтүү болот; Ошентип, гендин өзгөрүшү убактылуу экспрессияны пайда кылат. Бул трансфекция ыкмасы жөнөкөй жана тез; ошондуктан аны дайыма колдонсо болот. Убактылуу трансфекциянын бир кемчилиги - протеин синтезинин масштабдуу системаларына колдонуунун кыйынчылыгы.
Стабилдүү трансфекция учурунда максаттуу ген кабыл алуучу клетканын геномуна интеграцияланат, ошондуктан гендин экспрессиясы убактылуу трансфекциядан айырмаланып, туруктуу болот.
Трансформация менен Трансфекциянын ортосунда кандай айырма бар?
• Трансформация – бул гендин прокариоттук клеткага (бактериялык жана ачыткы) кириши, ал эми трансфекция адатта сүт эмүүчүлөрдүн клеткасына гендин кириши деп аталат.
• Трансформация гендерде тукум куума өзгөрүүгө алып келет, ал эми трансфекция гендерде убактылуу экспрессияга же туруктуу өзгөрүүлөргө алып келиши мүмкүн.
