Негизги айырма – Убактылуу жана туруктуу трансфекция
Трансфекция – химиялык же физикалык ыкмалар менен эукариоттук клеткалардын гендерин өткөрүү процесси. Трансфекцияны убактылуу трансфекция жана туруктуу трансфекция деп аталган негизги эки түргө бөлүүгө болот. Убактылуу трансфекция учурунда кызыкчылык гени кабыл алуучу геном менен интеграцияланбай калат жана кыска мөөнөткө убактылуу түрдө хосттун ичинде көрсөтүлөт, ал эми туруктуу трансфекцияда кызыгуу гени кабыл алуучу геном менен интеграцияланат жана бир нече муундарда узак мөөнөткө сакталат.. Бул убактылуу жана туруктуу трансфекциянын ортосундагы негизги айырма. Эки учурда тең трансфекция ийгиликтүү болуп, гендер экспрессияланат.
Убактылуу трансфекция деген эмне?
Трансфекция эукариоттук клеткаларга гендерди киргизүү үчүн маанилүү курал болуп саналат. Трансфекциянын эки түрүнүн арасында убактылуу трансфекция генди өткөрүүдө кеңири таралган ыкма болуп саналат. Вектор аркылуу бөтөн гендер кабыл алуучу клетканын ичинде өзгөртүлөт. Чет элдик ДНК кабыл алуучу клеткага киргенден кийин, анын эки жолу бар. Ал же кабыл алуучу геном менен интеграцияланып, репликацияланышы мүмкүн, же геномго интеграцияланбастан ичинде кала алат. Убактылуу трансфекция кабыл алуучу геномго интеграцияланбастан киргизилген гендердин убактылуу экспрессиясын көрсөтөт. Гендер клетка бөлүнгөнгө чейин коддолгон протеинди экспрессиялайт жана өндүрөт. Бирок интеграцияга жөндөмсүздүктөн улам кайталанып, кийинки муундарга кире албайт. Трансфекциянын бул түрү кыска мөөнөткө ийгиликтүү болот. Клетканын бөлүнүшү учурунда же башка факторлордон улам бөтөн ДНК бузулууга дуушар болот. Убактылуу трансфекция бөтөн ДНК өтө ийилген ДНК түрүндө болгондо көрсөтүлөт.
01-сүрөт: Убактылуу трансфекция
Туруктуу трансфекция деген эмне?
Стабилдүү трансфекция чет өлкөлүк гендердин хост геномуна ийгиликтүү интеграциясын көрсөтөт. Чет элдик ДНК кабыл алуучу клетканын ичине киргенден кийин, чет элдик ДНКнын бир бөлүгү кабыл алуучу геном менен интеграцияланып, анын бир бөлүгү болуп калат. Демек, чет элдик ДНК да репликацияланат жана кабыл алуучу геном көбөйгөндө келечек муундарга өтөт. Трансфекциянын бул түрү татаал жана сейрек кездешет. Бирок, геномго туруктуу трансфекциядан улам, бул өзгөчөлүк бир нече муунга чейин узак мөөнөткө сакталат.
Стабилдүү трансфекция татаал процесс жана ДНКнын эффективдүү жеткирилишин жана анын геномуна чет элдик ДНКны клетканын алуусун талап кылат. Демек, сызыктуу ДНК тегерек ДНКга караганда туруктуу трансфекцияны колдойт. Бирок, туруктуу трансфекция ылдамдыгы болжол менен 104 трансформацияланган клеткадан бирди түзөт. Туруктуу трансфекцияны тандалуучу маркердин котрансфомациясы жана чөйрөдө жасалма тандоону жүргүзүү аркылуу байкоого болот.
02-сүрөт: Туруктуу трансфекция
Убактылуу жана туруктуу трансфекциянын ортосунда кандай айырма бар?
Убактылуу жана туруктуу трансфекция |
|
| Чет элдик ДНК кабыл алуучу геномго интеграцияланбайт. | Чет элдик ДНК кабыл алуучу геном менен интеграцияланып, анын бир бөлүгү болуп калат. |
| Хост ичиндеги репликация | |
| Транзиенттүү трансфекцияланган гендер хосттун ичинде репликацияланбайт. Ошондуктан гендер кийинки муундарга берилбейт. | Гендер хосттун ичинде репликацияланат жана кийинки муундарга берилет. |
| Ген экспрессиясынын узактыгы | |
| Гендер чектелген убакыт аралыгы үчүн көрсөтүлөт жана андан кийин алар жок кылынат. | Гендер геномдун бир бөлүгү болуп калат жана муундун ичинде узак убакыт бою экспрессияланат. |
| Колдонуу | |
| Бул гендердин же ген продуктуларынын кыска мөөнөттүү экспрессиясынын таасирин изилдөө үчүн пайдалуу. | Бул ген экспрессияларынын узак мөөнөттүү таасирин изилдөө үчүн пайдалуу. |
| Трансфекцияны аныктоо | |
| Гендер экспрессияланган жана кабарчы генди киргизүү менен оңой аныкталат. | Туруктуу трансфекцияны тандап алуучу маркерди киргизүү жана медиадагы жасалма тандоо аркылуу оңой аныктоого болот. |
| Келишим жана процесс | |
| Убактылуу трансфекция кеңири таралган жана аны аткаруу татаал эмес. | Туруктуу трансфекция сейрек кездешет жана аткарууга татаал. |
| ДНКнын табияты | |
| Жогорку ширелген ДНК убактылуу трансфекцияга ылайыктуу. | Сызыктуу ДНК туруктуу трансфекцияга ылайыктуу. |
| Колдонмолор | |
| Бул генди кулатууну же ингибитордук РНКлар менен унчукпай коюуну, аз өлчөмдө белок өндүрүүнү изилдөө үчүн колдонулат | Бул протеинди өндүрүү үчүн кеңири масштабдуу, узак мөөнөттүү фармакология изилдөөлөрүндө, ген терапиясында, узак мөөнөттүү генетикалык жөнгө салуу механизмдерин изилдөөдө колдонулат |
Корытынды – Убактылуу жана туруктуу трансфекция
Убактылуу жана туруктуу трансфекциялар – вирустук эмес негиздеги системалар аркылуу эукариоттук клеткаларга өтүүчү гендин жүрүшүндө көрсөтүлгөн трансфекциялардын эки түрү. Трансформацияланган бөтөн ДНК убактылуу трансфекцияда кабыл алуучу геном менен интеграцияланбайт, ал эми туруктуу трансфекцияда кабыл алуучу геном менен интеграцияланат. Тегерек ширелишкен ДНК өткөөл трансфекцияны көрсөтөт, ал эми сызыктуу ДНК туруктуу трансфекцияны жактырат. Бул убактылуу жана туруктуу трансфекциянын ортосундагы айырма. Бирок убактылуу трансфекция туруктуу трансфекцияга салыштырмалуу кеңири таралган жана оңой. Бирок экөөнүн ичинен бирин тандоо генди өткөрүү максатына жана изилдөө долбоорунун узактыгына жараша болот.
