Негизги айырмасы – Капиллярдык электрофорез менен гель электрофорези
Электрофорез - бул бөлүкчөлөрдүн зарядына, бөлүкчөлөрдүн өлчөмүнө жана бөлүкчөлөрдүн формасына жараша биомолекулаларды бөлүү үчүн колдонулган ыкма. Электрофоретикалык мобилдүүлүк деп аталган молекуланын миграциясы колдонулган полимердин/гелдин түрүнө, анын тешикчелеринин өлчөмүнө, берилген чыңалууга, иштөө убактысына жана беттин көлөмгө катышына жараша болот. Колдонулган биомолекуланын түрүнө жараша электрофорез ыкмаларынын ар кандай түрлөрү бар. Электрофорездин биринчи түрү биомолекулаларды бөлүү үчүн чөйрө катары нитроцеллюлоза кагазы колдонулган кагаз электрофорези болгон. Гель электрофорезинин принциби кийинчерээк ойлоп табылган. Гель электрофорезинин техникасы техниканын тактыгын жогорулатуу үчүн андан ары өзгөртүлгөн жана ошондой модификациялардын бири капиллярдык электрофорез болуп саналат. Капиллярдык электрофорез менен гель электрофорезинин ортосундагы негизги айырма, гель электрофорези вертикалдык же горизонталдуу тегиздикте стандарттуу тешикче өлчөмдөгү полимердик гелди колдонуу менен жүргүзүлөт, ал эми капиллярдык электрофорез капиллярдык түтүктө полимер суюктугу же гели менен аткарылат.
Гель электрофорез деген эмне?
Гель электрофорези – зарядына, өлчөмүнө жана формасына жараша негизинен нуклеиндик кислоталарды, белокторду же аминокислоталарды бөлүү үчүн колдонулган ыкма. Бул ыкма бөлүү чөйрөсү катары полимердик зат болгон физикалык гелди колдонот. Көбүнчө колдонулган гельдер агароза (нуклеин кислотасын бөлүү үчүн) жана полиакриламид (белок бөлүү үчүн) болуп саналат. Гель электрофоретикалык аппаратында гелди даярдоо үчүн гель куюу лоток, скважиналарды даярдоо үчүн куюу тарактары, буфердик резервуар, электроддор – оң (анод) жана терс (катод) жана чыңалуу менен камсыздоо блогу бар. Терс заряддуу ДНК же РНК сыяктуу молекулалар катоддон анодго, ал эми оң заряддуу молекулалар тескерисинче жылат. Гель даярдоо талапка ылайык жүргүзүлөт. Эгерде молекулалардын жогорку резолюциясы же бөлүнүшү талап кылынса, тешикчелердин көлөмү азыраак жогорку концентрациялуу гель даярдалышы керек. Гель матрицасында бөлүнгөн молекулалар боёо ыкмасынан кийин байкалат. Бөлүнгөн молекулалар гел матрицасында тилкелер катары көрүнөт.
01-сүрөт: Гель электрофорез
Гель электрофорези белгилүү бир ДНК/РНК фрагментинин же белоктун бар экендигин аныктоо үчүн ДНК манжа изин алуу сыяктуу молекулярдык диагностикада колдонулат. Гель электрофорез да алынган биомолекула үлгүсүнүн тазалыгын аныктайт. Гель электрофорези гибриддештирүү жана гибриддештирүү үчүн алдын ала кадам катары жана секвенирлөөдөн кийин ырастоочу анализ катары аткарылат.
Капиллярдык электрофорез деген эмне?
Капиллярдык электрофорез – зарядга, молекуланын өлчөмүнө жараша бөлүү принцибинин бирдей колдонулуучу гел электрофорезинин модификациясы, бирок капиллярдык түтүктө гел заты же суюк полимер менен аткарылат. Капиллярлар эриген кремнеземден даярдалат жана ар бир капиллярдык түтүктүн ички диаметри 50-100мкм жана узундугу 25-100см. Үлгүлөр полимердик материалды камтыган капиллярдык түтүккө куюлат жана кадимки гел электрофорезине караганда бир топ тез бөлүнөт. Капиллярдык система үлгүнү ар кандай булгануудан коргой турган изолятор курткасынын ичинде жакшы корголгон. Капиллярларды гидроксиэтил целлюлоза сыяктуу суюк полимерлер же полиакриламид сыяктуу жогорку резолюциядагы гелдер менен толтурса болот. Капиллярдык электрофорез көбүрөөк чечүүнү камсыз кылат; демек, бөлүү такыраак. Капиллярдык электрофорезде спектрофотометриялык анализ аркылуу автоматташтырылган детектордук система колдонулат. Бул беттин аянтынын көлөмгө болгон катышына байланыштуу.
02-сүрөт: Капиллярдык электрофорез
Капиллярдык электрофорез жогорку тактык талап кылынган криминалистика сыяктуу кырдаалдарда колдонулат жана ал кымбат техника болгондуктан көп колдонулбайт.
Капиллярдык электрофорез менен гелдик электрофорездин кандай окшоштуктары бар?
- Эки ыкмада тең молекулаларды бөлүү молекуланын зарядына жана өлчөмүнө негизделет.
- Эки ыкманы тең нуклеиндик кислоталарды жана белокторду бөлүү үчүн колдонсо болот.
- Эки техниканын үлгү көлөмү бирдей.
- Экөө тең бөлүүнү жеңилдетүү үчүн буферди колдонот.
Капиллярдык электрофорез менен гелдик электрофорездин ортосунда кандай айырма бар?
Капиллярдык электрофорез vs Гель электрофорез |
|
| Капиллярдык электрофорез - суюктук же гелдик полимердик чөйрөнү колдонуу менен капиллярдык түтүктөгү биомолекулаларды бөлүүчү ыкма. | Гель электрофорези – бул полимердик гелди чөйрөнүн жардамы менен вертикалдуу же горизонталдык тегиздикте биомолекулаларды бөлүүчү ыкма. |
| Бөлүү | |
| Капиллярдык электрофорезде бөлүү капиллярдык түтүктүн ичинде жүргүзүлөт. | Гель электрофорезинде бөлүү вертикалдуу же горизонталдуу тегиздикте жүргүзүлөт. |
| Ажыратуунун ортосу | |
| Капиллярдык электрофорезде гидроксиэтилцеллюлоза сыяктуу суюк полимерлер колдонулат. | Гельдер, же агароза же полиакриламид, гел электрофорезинде чөйрө катары колдонулат. |
| кайчылаш байланыш | |
| Капиллярдык электрофорезден жогорку резолюцияны алууга болот. | Гель электрофорезинде чечим төмөн. |
| Беттик аянттын көлөмгө катышы | |
| Капиллярдык электрофорезде беттин көлөмгө катышы жогору. | Гель электрофорезинде беттин көлөмгө катышы төмөн. |
| Аныктоо техникасы | |
| Аныктоо капиллярдык электрофорездеги спектрофотометрдик автоматташтырылган детекторлор аркылуу ишке ашырылат. | Боёо жана УК-трансиллюминатор аркылуу байкоо гел электрофорезинде аныктоо ыкмалары катары жасалат. |
Кыскача маалымат – Капиллярдык электрофорезге каршы гелдик электрофорез
Молекулярдык диагностика илим дүйнөсүндө чоң роль ойнойт. ДНКны, РНКны жана протеиндерди аныктоо жана тазалоо диагностикалык процедуралардын маанилүү кадамдары болуп саналат. Электрофорез - бул гел электрофорезинде да, бир топ өнүккөн капиллярдык гел электрофорезинде да биомолекулаларды бөлүүчү жана аныктоочу ыкма. Гель электрофорези вертикалдуу же горизонталдуу тегиздикте стандарттуу тешикче өлчөмдөгү полимердик гелди колдонуу менен жүргүзүлөт, ал эми капиллярдык электрофорез полимер суюктугу же гели бар капиллярдык түтүктө жүргүзүлөт. Бул капиллярдык электрофорез менен гел электрофорезинин айырмасы. Электрофорез техникасы аяктагандан кийин, биомолекулалар гибриддештирүү же манжа изи сыяктуу ыкмалар аркылуу жогорку деңгээлдеги маалыматты алуу үчүн иштетилет.
Капиллярдык электрофорезге каршы гель электрофорезинин PDF версиясын жүктөп алыңыз
Сиз бул макаланын PDF версиясын жүктөп алып, шилтеме эскертүүсүнө ылайык оффлайн максаттарында колдоно аласыз. Сураныч, PDF версиясын бул жерден жүктөп алыңыз Гель электрофорез менен капиллярдык электрофорездин айырмасы.
