Негизги айырма – RPMI менен DMEM
Көпчүлүк изилдөөлөр жаныбарлардын клеткаларын өстүрүүнү камтыйт, ошондуктан бул изилдөөлөр жаныбарлардын клетка линияларын өзгөчө өсүү шарттарында сактоону талап кылат. Жаныбарлардын клеткаларын өстүрүү фармакологиялык изилдөөлөрдө, дарылардын метаболизмин аныктоодо, ооруларды диагностикалоодо жана ракты изилдөөдө кеңири колдонулат. Клетка маданиятынын медиасы жаныбарлардын клетка маданиятынын маанилүү аспектиси болуп саналат. Dulbecco анын Modified Eagle Medium (DMEM) жана Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) жаныбарлардын клетка өстүрүү колдонулган эки маданий медиа болуп саналат. RPMI суспензия культурасында сүт эмүүчүлөрдүн клеткаларын өстүрүү үчүн кеңири колдонулган маалымат каражаты. DMEM базалдык чөйрөнүн өзгөртүлгөн түрү, аминокислоталардын жана витаминдердин концентрациясын төрт эсеге чейин жогорулатат. DMEM жабышкан маданияттарда клеткаларды өстүрүүдө колдонулат. Эки медианын ортосундагы негизги айырма - бул маалымат каражаттарынын маданиятынын түрү. RPMI суспензия культураларында колдонулат, ал эми DMEM жабышкан клеткаларды өстүрүү үчүн колдонулат.
RPMI деген эмне?
RPMI же Розуэлл Парк мемориалдык институту RPMI 1640 деп да аталат. ЖМКнын аталышы медиа ачылган институт тарабынан алынган. Бул медиа көбүнчө жаныбарлардын клетка маданиятында, айрыкча сүт эмүүчүлөрдүн клеткаларынын өсүшү үчүн колдонулат. Алар алгач адамдын лимфоциттерин өстүрүү үчүн иштелип чыккан.
Төмөнкү ингредиенттер RPMIге киргизилген.
- Глюкоза
- pH индикатору (фенол кызыл)\
- Туздар (натрий хлориди, натрий гидрокарбонаты, динатрий фосфаты, калий хлориди, магний сульфаты жана кальций нитраты)
- Аминокислоталар
- Витаминдер (i-inositol, холин хлориди, пара-аминобензой кислотасы, фолий кислотасы, никотинамид, пиридоксин гидрохлориди, тиамин гидрохлориди, кальций пантотенаты, биотин жана рибофлавин, цианокобаламин)
RPMIнин өзгөчөлүгү чөйрөдө фосфаттын концентрациясынын жогорулашы болуп саналат. RPMI 5% көмүр кычкыл газы атмосферасында колдонулат. Бул клетканын өсүшү үчүн максималдуу жана оптималдуу шарттарды камсыз кылат. Бикарбонатты буферлөө системасы аркылуу медианын рН 8,0 деңгээлинде сакталат.
01-сүрөт: Петри табагындагы клетка маданияты
Клеткаларды өстүрүүдө RPMI колдонмолору
- Адамдын Т жана В лимфоциттерин, жилик чучугунун клеткаларын жана гибридоманы өстүрүү.
- Адамдын шишик клеткаларын изилдөө үчүн колдонулат.
DMEM деген эмне?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) коммерциялык түрдө даярдалган өзгөртүлгөн каражат. Орто порошоктун баштапкы текстурасы сары. DMEMде витаминдин концентрациясы төрт эсеге чейин көбөйөт, ошону менен чөйрөдөгү аш болумдуу заттар көбөйөт.
DMEM ошондой эле темир нитраты, натрий пируваты жана серин жана глицин сыяктуу кээ бир маанилүү эмес аминокислоталар сыяктуу көбүрөөк туздарды кошуу менен өзгөртүлөт. ЖМКдагы глюкозанын түзүлүшү да өзгөрөт. Баштапкы формула 1000 мг/л глюкозадан турат, ал эми DMEMде концентрация 4500 мг/лге чейин көбөйөт. DMEM ошондой эле сыворотка чөйрөсүн толуктоону талап кылат, анткени ал толук чөйрө эмес. Көбүнчө, DMEM түйүлдүктүн бодо сарысы (FBS) менен толукталат. FBS культурация процесси үчүн керектүү протеиндерди жана өсүү факторлорун камсыздайт.
Ортодогу рН натрий бикарбонатын кошкондо өзгөрөт. Натрий бикарбонатын кошконго чейин чөйрөнүн рН 6,80 – 7,40 тегерегинде, ал эми натрий бикарбонатын кошкондон кийинки рН 7,60 – 8,20 диапазонунда. Сактагычтын температурасы 2 – 8 0C.
02-сүрөт: DMEM
DMEM колдонмолору
- Чычкандын эмбриондук клеткаларында полиомавирустун бляшка түзүүчү жөндөмүн изилдөө.
- Байланышты бөгөт коюу изилдөөлөрүндө.
- Тоок клеткасынын маданиятын изилдөөдө жана талдоодо.
RPMI менен DMEMдин кандай окшоштуктары бар?
- RPMI жана DMEM экөө тең жаныбарлардын клетка маданиятында колдонулат.
- RPMI жана DMEM медиалары тең суюк формулалар.
- RPMI жана DMEM медиаларында өсүү үчүн зарыл болгон маанилүү аминокислоталар, витаминдер жана органикалык эмес туздар бар.
- RPMI жана DMEM медиалары тең толук эмес. Ошондуктан, сыворотка кошулушу керек.
- RPMI жана DMEM медиалары тең көмүртек булагы катары глюкозаны колдонушат.
- RPMI жана DMEM медиасынын тең рНы жогору.
RPMI менен DMEMдин ортосунда кандай айырма бар?
RPMI крш DMEM |
|
| RPMI – суспензия культурасында сүт эмүүчүлөрдүн клеткаларын өстүрүү үчүн кеңири колдонулган каражат. | DMEM – аминокислоталардын жана витаминдердин концентрациялары жогорулаган базалдык чөйрөнүн өзгөртүлгөн түрү. |
| Кошумча фосфаттардын болушу | |
| RPMIде бар. | DMEMде жок. |
| Колдонуу | |
|
Жабышкан маданияттардагы клеткаларды өстүрүү үчүн колдонулат. Ал көнүп калган,
|
| Маданияттын түрлөрү | |
| RPMI суспензия культуралары үчүн колдонулат. | DMEM клетка жабышкан маданияттар үчүн колдонулат. |
Корытынды – RPMI жана DMEM
RPMI жана DMEM экөө тең жаныбарлардын клеткаларын өстүрүүдө, өзгөчө жаныбарлардын клетка линияларын, анын ичинде лимфоциттерди in vitro өстүрүүдө кеңири колдонулат. DMEM көбөйгөн аш болумдуу концентрациясы бар өзгөртүлгөн базалдык чөйрө болуп саналат. RPMI Розуэлл Парк мемориалдык институту тарабынан иштелип чыккан жана ал ошондой эле сүт эмүүчүлөрдүн лимфоциттери үчүн жаныбарлардын клеткаларын өстүрүүдө колдонулган чөйрө болуп саналат. Эки медиа тең коммерциялык жактан жеткиликтүү. Бул RPMI менен DMEMдин ортосундагы айырма.
