Негизги айырмасы – Кагаз менен Жука катмар менен мамычанын хроматографиясы
Кагаз хроматографиясы, жука катмар хроматографиясы жана колонна хроматографиясы хроматографиялык техниканын үч түрү болуп саналат. Кагаз хроматографиясынын, жука катмар хроматографиясынын жана мамычанын хроматографиясынын ортосундагы негизги айырма хроматография техникасында колдонулган стационардык фазанын түрүнө негизделген. Кагаз хроматографиясы стационардык фаза катары целлюлоза кагазын колдонот, Жука катмар хроматографиясы стационардык фазасы катары глиноземди же силикагельди колдонот, ал эми Колонна хроматографиясы стационардык фаза катары ылайыктуу матрицалык материал менен таңгакталган колонканы колдонот.
Белоктор жана углеводдор сыяктуу биомолекулаларды бөлүү жана идентификациялоо процессинде хроматография колдонулган маанилүү биофизикалык техника болуп саналат. Хроматография кошулмаларды эригичтигине, өлчөмүнө жана зарядына жараша бөлөт. Бөлүү механизминин негизинде хроматография ион алмашуу, абсорбция, бөлүштүрүү жана өлчөмдү алып салуу сыяктуу механизмдерди колдонот жана үч хроматографиялык ыкма бар; атап айтканда, кагаз, жука катмар жана колонна хроматографиясы. Кагаз хроматографиясы кошулмалардын катуу-суюктук адсорбциясына жана эригичтигине негизделген жана стационардык фаза катары целлюлоза кагазын колдонот. Жука катмар хроматографиясы молекулалардын катуу-суюктук адсорбциясына негизделген. Анын стационардык фазасы бар, ал адатта глиноземден же силикагельден жана эриткич болуп саналган мобилдик фазадан турат. Мамыча хроматографиясы молекулаларды чоңдугуна, жакындыгына же зарядына жараша бөлүү үчүн колдонулган матрицага толтурулган тилкени колдонот.
Кагаз хроматографиясы деген эмне?
Кагаз хроматографиясы колдонулган хроматографиянын эң жөнөкөй түрү жана ал кеңири изилдөө үчүн колдонулбайт. Ал негизинен студенттик лабораторияларда аралашмалардагы аминокислоталар жана углеводдор сыяктуу биомолекулаларды аныктоо үчүн колдонулат. Кагаз хроматографиясы целлюлоза кагазын же ватман фильтр кагазын колдонуу менен жасалган стационардык фазаны жана адатта n-бутанол сыяктуу органикалык эриткичтерди колдонуу менен даярдалган кыймылдуу фазаны колдонот. Стационардык фаза сууга каныккандыктан, стационардык фаза суюктукка айланат. Ошентип, кошулмалар тагы жана кыймылдуу фазанын катышуусунда иштөөгө мүмкүндүк бергенде, кошулмалардын эригичтигине жараша, алар бөлүнөт. Ошентип, хроматограмманы иштеп чыгуу боюнча, боёк ар бир кошулмалардын узундугун аныктоо үчүн жүргүзүлүшү мүмкүн. Ушуну менен кармап калуу коэффициентин эсептөөгө болот.
01-сүрөт: Кагаз хроматографиясы
Кагаз хроматографиясы иштеп жаткан эриткичтин багытына жараша жогорулоочу кагаз хроматографиясы жана төмөндөөчү кагаз хроматографиясы болуп бөлүнөт.
Жука катмар хроматографиясы деген эмне?
Жука катмар хроматографиясы же TLC аралашмадагы ар кандай аминокислоталарды аныктоо же белокторду идентификациялоо үчүн кеңири колдонулган ыкма. Бөлүү техникасы катуу суюктуктун адсорбциясына негизделген. Жука катмар хроматографиясында стационардык фаза катары глинозем же силикагельден жасалган пластинка колдонулат. Эриткичтин аралашмасы талапка жараша өзгөрүп турат жана эриткичти даярдоо үчүн n-бутанол, уксус кислотасы жана суу сыяктуу органикалык кошулмалардын ар кандай айкалыштарын колдонушу мүмкүн. Бөлүнүүчү кошулмалар пластинкага түшүрүлүп, эриткичтин аралашмасына батырылат. Пластинка берген капиллярдык аракеттин негизинде эриткич өйдө көтөрүлгөндөн кийин, пластинкада такталган кошулмалар да эриткичте эригичтигине жараша жылышат.
02-сүрөт: Жука катмар хроматографиясы
Хроматограммадан кийин тактарды аныктоо ар кандай боёо процедуралары менен жүргүзүлөт. Кээ бирлери нингидрин менен боёшот, бул абдан уулуу боёо ыкмасы. Заманбап жука катмар хроматограммалары чуркоодон кийин хроматограмманы көрүү үчүн флуоресценттик ыкмаларды колдонушат. Ал басып өткөн аралыкка жараша, ар бир кошулманы кармоо убактысын эсептөөгө болот. Бул колдонулган аралашма боюнча бөлүнгөн кошулма түрүн аныктоо үчүн колдонулушу мүмкүн. TLC негизинен белок аралашмасындагы аминокислоталарды аныктоо үчүн, ошондой эле аралашмадагы моносахариддердин ар кандай түрлөрүн бөлүп алуу үчүн колдонулат.
Мамыча хроматографиясы деген эмне?
Мамычалык хроматография - колоннага негизделген бөлүү ыкмасын колдонгон хроматография техникасынын көптөгөн түрлөрүн сүрөттөө үчүн колдонулган кеңири термин. Колонна хроматографиясында кошулмаларды бөлүү үчүн таңгактоочу материал менен физикалык колонка колдонулат. Бөлүү кошулмалар көрсөткөн ар кандай физикалык касиеттерге негизделиши мүмкүн. Бул касиеттер заряд, өлчөм, 3D конформациясы жана туташтыруу жөндөмдүүлүгү, ж.б. болушу мүмкүн. Ошентип, матрицалык материал менен таңылган колонка стационардык фазанын, ал эми колонкага колдонулган жуу буфери мобилдик фазанын ролун аткарат.
Эгер молекулалар өлчөмүнө жараша бөлүнсө, таңгактоочу материал кошулмалардын өтүшү үчүн тешикчелерди калтыргыдай кылып таңгакталган. Ошентип, тешикчелерден өтө албаган чоңураак молекулалар адегенде элюталанат, ал эми кичирээк молекулалардын элюциясы бир топ убакытты талап кылат.
03-сүрөт: Мамыча хроматографиясы
Эгер молекулалар зарядынын негизинде бөлүнсө, стационардык фазада анион же катион алмаштыргыч болот, ага кошулмалар зарядына жараша тартылат. Ошентип, жуу кадамы учурунда байланышпаган кошулмалар элюталанат. Элюциялык буферди кошкондо, байланган заряддуу кошулмалар элюцияланат. Бул элюенттерди аныктоо көбүнчө спектрофотометриялык ыкмаларга негизделген.
Кагаздын жука катмары менен мамыча хроматографиясынын кандай окшоштуктары бар?
- Бардык кагаз жука катмары жана мамыча хроматографиясы аминокислоталар, белоктор жана углеводдор сыяктуу биомолекулаларды бөлүү үчүн үч ыкма колдонулат.
- Кагаз жука катмарынын жана мамычанын хроматографиясынын ыкмалары мобилдүү фазага жана стационардык фазага ээ.
- Кагаз жука катмары жана мамыча хроматографиясы ыкмалары бөлүү үчүн биофизикалык механизмдерди колдонот.
Кагаз жука катмары менен мамыча хроматографиясынын ортосунда кандай айырма бар?
Кагазга каршы жука катмарга каршы тилке хроматография |
|
| Кагаз хроматография | Кагаз хроматографиясы кошулмалардын суюктук-суюктук адсорбциясы жана эригичтигинин негизинде кошулмаларды бөлүү үчүн колдонулган хроматографиялык ыкма. Ал стационардык фаза катары целлюлоза кагазын колдонот. |
| Жука катмар хроматографиясы | Жука катмар хроматографиясы молекулалардын катуу-суюктук адсорбциясына негизделген дагы бир хроматографиялык ыкма. Анын глинозем же силикагельден жасалган стационардык фазасы жана кыймылдуу фаза катары эриткич бар, ал эриткич болуп саналат. |
| Мамыча хроматографиясы | Матрица хроматографиясы молекулаларды чоңдугуна, жакындыгына же зарядына жараша бөлүү үчүн колдонулган матрица менен камтылган мамычаны колдонот. |
| Стационардык фаза | |
| Кагаз хроматография | Ватмандын нитроцеллюлозасынан жасалган кагаз кагаз хроматографиясында стационардык фаза катары колдонулат. |
| Жука катмар хроматографиясы | Глинозем же силикагель жука катмар хроматографиясынын стационардык фазасы катары колдонулат. |
| Мамыча хроматографиясы | Тийиштүү таңгактоочу материал менен таңгакталган колонка колонна хроматографиясында стационардык фаза катары колдонулат. |
| Мобилдик фаза | |
| Кагаз хроматография | Иште турган эриткич кагаз хроматографиясынын кыймылдуу фазасы. |
| Жука катмар хроматографиясы | Иште турган эриткич – жука катмар хроматографиясынын кыймылдуу фазасы. |
| Мамыча хроматографиясы | Жуу буфери колонна хроматографиясынын мобилдик фазасы. |
| Бөлүү үчүн колдонулган механизмдер | |
| Кагаз хроматография | Кагаз хроматографиясы катуу суюктукту сиңирүүгө негизделген. |
| Жука катмар хроматографиясы | Жука катмар хроматографиясы катуу суюктуктун сиңирүүсүнө негизделген. |
| Мамыча хроматографиясы | Мамыча хроматографиясы өлчөмгө, зарядга жана формага негизделген. |
| Элюция буфери | |
| Кагаз хроматография | Кагаз хроматографиясы талап кылбайт. |
| Жука катмар хроматографиясы | Жука катмар хроматографиясы үчүн талап кылынбайт. |
| Мамыча хроматографиясы | Мамыча хроматографиясында талап кылынат. |
| Аныктоо | |
| Кагаз хроматография | Боёо жана кармап калуу факторун аныктоо менен. |
| Жука катмар хроматографиясы | Боёо жана кармап калуу факторун аныктоо менен. |
| Мамыча хроматографиясы | Спектрофотометрикалык аныктоо. |
Кыскача маалымат – Жука кагаз катмары менен мамыча хроматографиясы
Кагаз хроматографиясы, TLC жана мамычалар хроматографиясы белоктор, аминокислоталар жана углеводдор (негизинен моносахариддер) сыяктуу биомолекулаларды бөлүү үчүн колдонулган бөлүү ыкмалары. Кагаз хроматографиясында стационардык фаза катары целлюлоза кагазы колдонулат, ал эми бөлүү механизми катуу-суюк адсорбцияга негизделген. TLC ошондой эле катуу-суюктук адсорбция механизмдерин колдонот. Молекулалар кыймылдуу фазада эригичтигине жараша стационардык фазада бөлүнөт. Мамыча хроматографиясы бөлүү үчүн кошулмалардын өлчөмү, формасы, заряды жана молекулалык салмагы сыяктуу физикалык касиеттерди колдонот. Матрицалык материал менен толтурулган колонна стационардык фаза катары иштейт, ал эми жуугуч буфер эритүүчү фаза катары иштейт. Бул жука кагаз катмары менен мамычанын хроматографиясынын ортосундагы айырма.
