Генди күчтөндүрүү менен генди клондоштуруунун негизги айырмасы генди күчөтүү полимераздык чынжыр реакциясы аркылуу in vitro кызыктырган гендин көп көчүрмөсүн жасоо процесси. Бирок, генди клондоо - бул рекомбинантты плазмидди жасап, аны кабыл алуучу бактерияга айландыруу жолу менен in vivo кызыккан гендин көптөгөн көчүрмөлөрүн жасоо процесси.
Ген – бул протеинди коддогон ДНКнын белгилүү бир фрагменти. Бир организм миңдеген гендерге ээ. Мындан тышкары, молекулярдык биологиялык ыкмаларды колдонуу менен маанилүү гендердин ДНК тизмегин көбөйтүүгө болот. Генди күчөтүү жана генди клондоо - бул эки процедура. Эки процедура тең кызыккан гендин көптөгөн көчүрмөлөрүн чыгарат. Бирок алардын методологиясы жагынан генди күчөтүү менен ген клондоштуруунун ортосунда айырма бар.
Генди күчөтүү деген эмне?
Генди күчөтүү – бул полимераздык чынжыр реакциясын колдонуу менен белгилүү бир гендин көчүрмөсүн жасоо процесси. Генди күчөтүү үчүн, ошол организмдин ДНКсы туура ДНК алуу протоколун колдонуу менен алынышы керек. Андан кийин ажыратылган бир тилкелерди алуу үчүн экстракцияланган эки тилкелүү ДНКны денатурациялоо керек. Кийинки кадам кызыккан гендин көчүрмөсүн жасоо үчүн ПТР реакциясын колдонууну камтыйт. Андан тышкары, ПТР аралашмасы талап кылынган праймерлерди, нуклеотиддерди, ДНК-полимераза ферментин, шаблон ДНКсын жана башка ингредиенттерди камтыйт. КНРдин программасы аяктагандан кийин кызыккан гендин күчөшү ишке ашат.
01-сүрөт: Генди күчөтүү
Мындан тышкары, генди күчөтүү белгилүү бир ырааттуулукту аныктоодогу, организмди идентификациялоодогу, ооруларды диагностикалоодогу жана ген китепканаларын түзүүдөгү ж.б.у.с. алгачкы кадам болуп саналат.
Генди клондоо деген эмне?
Генди клондоо – гендик инженерияда ген китепканаларын түзүү же кызыккан гендин көптөгөн көчүрмөлөрүн жасоо ыкмасы. Бул процесс рекомбинантты плазмидди жасоону жана рекомбинантты плазмидди кабыл алуучу клеткага, өзгөчө бактериялык клеткага айландырууну камтыйт. Клон – бул баштапкы организмдин же молекуланын окшош көчүрмөсү. Гендерди клондоо миңдеген ген клондорун түзө алат.
02-сүрөт: Гендерди клондоо
Кызыккан ген аныкталгандан кийин, аны белгилүү бир организмдин геномунан аны атайын чектөө ферменттери менен чектөө аркылуу ажыратууга болот. Андан кийин ошол эле чектөө ферментин колдонуп, ген фрагментин киргизүү үчүн плазмидаларды (векторлорду) ачуу керек. Андан кийин рекомбинантты плазмид электропорация сыяктуу ар кандай ыкмаларды колдонуу менен кабыл алуучу бактерияга айландырылат. Кээ бир рекомбинантты плазмиддер кабыл алуучу бактерия клеткаларына кирет. Антибиотиктин жардамы менен трансформацияланган бактерияларды тандап, бөлүп алып, жаңы чөйрөдө өстүрсө болот. Ошентип, бул ыкма миллиондогон ген клондорун алууга жардам берет.
Генди күчөтүү менен ген клондоштуруунун кандай окшоштуктары бар?
- Генди күчөтүү жана генди клондоо - бул эки молекулярдык биологиялык ыкма.
- Бул эки ыкмада тең белгилүү бир ДНК тизмеги же ген миллиондогон же миңдеген эсе көбөйөт.
- Андан тышкары, эки техника тең көптөгөн илимий тармактар үчүн абдан маанилүү.
Генди күчөтүү менен ген клондоштуруунун ортосунда кандай айырма бар?
Генди күчтөндүрүү – бул ПТР деп аталган in vitro ыкмасын колдонуу менен белгилүү бир гендин көчүрмөсүн жасоо процесси. Башка жагынан алганда, ген клондоштуруу рекомбинантты векторлорду куруу жана тирүү организмде аларды көбөйтүү аркылуу in vivo ыкмасын колдонуу менен белгилүү бир гендин көчүрмөсүн жасоочу процесс. Ошентип, бул генди күчөтүү менен ген клондоштуруунун ортосундагы негизги айырма. Мындан тышкары, генди клондоштуруу бир нече күндү талап кылса, генди күчөтүү бир нече саатты талап кылат. Ошондуктан, биз муну генди күчөтүү менен ген клондоштуруунун ортосундагы айырма катары карасак болот. Мындан тышкары, генди күчөтүү процесси каталарды азыраак көрсөтөт, ал эми генди клондоо процесси көбүрөөк каталарды көрсөтөт.
Төмөнкү инфографика генди күчөтүү менен ген клондоштуруунун ортосундагы айырманы жалпылайт.
Кыскача маалымат – Генди күчөтүү жана ген клондоо
Генди күчөтүү - бул in vitro шарттарда полимераздык чынжыр реакциясын колдонуу менен керектүү гендин көчүрмөсүн жасоо процесси, ал эми генди клондоо - бул рекомбинантты ДНК молекуласын жана тирүү организмди/хостту колдонуу менен кызыккан гендин көчүрмөлөрүн жасоо процесси. бактерия. Ошентип, бул генди күчөтүү менен ген клондоштуруунун ортосундагы негизги айырма.
