Негизги айырма – Агым цитометриясы менен FACS
Клетка теориясынын контекстинде клеткалар бардык тирүү организмдердин негизги структуралык жана функциялык бирдиги болуп саналат. Клетка сорттоо физиологиялык жана морфологиялык өзгөчөлүктөрүнө жараша ар кандай клеткаларды бөлүү үчүн колдонулган методология болуп саналат. Алар клетка ичиндеги же клеткадан тышкаркы мүнөздөмөлөргө ээ болушу мүмкүн. ДНКнын, РНКнын жана белоктордун өз ара аракеттенүүсү клетка ичиндеги интерактивдүү касиеттер, ал эми формасы, өлчөмү жана ар кандай беттик белоктор клеткадан тышкаркы касиеттер катары каралат. Заманбап илимде клеткаларды сорттоо методологиялары биологиялык изилдөөлөрдөгү ар түрдүү изилдөөлөргө жардам берүүгө, ошондой эле медицина боюнча изилдөөлөр аркылуу жаңы принциптерди орнотууга алып келди. Клеткаларды сорттоо ар кандай методологиялар боюнча жүргүзүлөт, алар азыраак жабдуулар менен примитивдүү да, татаал техниканы колдонуу менен алдыңкы технологиялык методологияларды да камтыйт. Агым цитометриясы, флуоресценттик активдештирилген клеткаларды сорттоо (FACS), магниттик клеткаларды тандоо жана бир клетка сорттоо колдонулган негизги методологиялар. Flow цитометрия жана FACS оптикалык касиеттерине жараша клеткаларды айырмалоо үчүн иштелип чыккан. FACS агым цитометриянын адистештирилген түрү болуп саналат. Агым цитометриясы – бул бир клетканы изилдөөгө мүмкүндүк берүүчү клетканын бетинин ар кандай молекулаларына, өлчөмүнө жана көлөмүнө жараша клеткалардын гетерогендүү популяциясын талдоодо колдонулган методология. FACS - бул клеткалардын үлгү аралашмасы жарык чачыратуу жана флуоресценттик мүнөздөмөлөрү боюнча эки же андан көп идиштерге сорттолгон процесс. Бул агым цитометриясы менен FACS ортосундагы негизги айырма.
Агым цитометриясы деген эмне?
Агым цитометриясы - клетка ичиндеги молекулалардын жана клетканын бетинин экспрессиясын изилдөө жана аныктоо, ошондой эле клетканын ар кандай түрлөрүн аныктоо жана мүнөздөө үчүн колдонулган ыкма. Ал ошондой эле клетканын көлөмүн жана клетка өлчөмүн аныктоодо жана изоляцияланган субпопуляциялардын тазалыгын баалоодо колдонулат. Бул бир эле учурда бир уячаларды көп параметрдүү баалоого мүмкүндүк берет. Агым цитометриясы флуоресцент менен белгиленген антителолордун натыйжасында пайда болгон флуоресценциянын интенсивдүүлүгүн өлчөө үчүн колдонулат, алар байланышкан клеткалар менен байланышкан белокторду же лиганддарды аныктоого жардам берет.
01-сүрөт: Агым цитометриясы
Жалпысынан, агым цитометриясы негизинен үч суб системаны камтыйт. Алар флюификаторлор, электроника жана оптика. Агым цитометриясында клеткаларды сорттоодо колдонулган беш негизги компонент бар. Алар, агым клеткасы (аларды ташуу жана оптикалык сезүү процесси үчүн клеткаларды тегиздөө үчүн колдонулган суюктуктун агымы), өлчөө системасы (ар кандай системалар болушу мүмкүн, анын ичинде сымап жана ксенон лампалары, жогорку кубаттуулуктагы суу менен муздатылган же аз кубаттуулуктагы аба менен муздатылган лазерлер же диоддук лазерлер), ADC; Аналогдуктан санарипке конвертер системасы, күчөтүү системасы жана талдоо үчүн компьютер. Сатып алуу - бул агым цитометринин жардамы менен үлгүлөрдөн маалыматтарды чогултуу процесси. Бул процесс агым цитометри менен туташтырылган компьютер аркылуу ишке ашырылат. Компьютерде бар программалык камсыздоо агым цитометринен компьютерге берилген маалыматты талдайт. Программа ошондой эле агымдын цитометрин башкаруучу эксперименттин параметрлерин тууралоо мүмкүнчүлүгүнө ээ.
FACS деген эмне?
Агым цитометриясынын контекстинде, Флуоресценция менен активдештирилген клеткаларды сорттоо (FACS) биологиялык клеткалардын аралашмасынын үлгүсүн дифференциялоодо жана сорттоодо колдонулган ыкма. Клеткалар эки же андан көп идиштен бөлүнгөн. Сорттоо ыкмасы клетканын жарык чачыратуу жана флуоресценттик мүнөздөмөлөрүн камтыган клетканын физикалык өзгөчөлүктөрүнө негизделген. Бул ар бир клеткадан чыккан флуоресценттик сигналдардын ишенимдүү сандык жана сапаттык натыйжаларын алуу үчүн колдонула турган маанилүү илимий техника. FACS учурунда, алгач, клеткалардын алдын ала алынган аралашмасы; суспензия тез аккан суюктуктун тар агымынын борборуна багытталган. Суюктуктун агымы ар бир клетканын диаметрине жараша суспензиядагы клеткаларды бөлүү үчүн иштелип чыккан. Суспензия агымына титирөө механизми колдонулат, анын натыйжасында жеке тамчылар пайда болот.
02-сүрөт: FACS
Тутум бир клетка менен бир тамчы түзүү үчүн калибрленген. Тамчылардын пайда болушуна чейин эле агымдын суспензиясы ар бир клетканын флуоресценция мүнөзүн аныктаган флуоресценттик өлчөөчү аппаратты бойлото жылат. Тамчылардын пайда болгон жеринде флуоресценциянын интенсивдүүлүгүн өлчөгөнгө чейин шакекчеге заряд индукцияланган электрдик заряддоо шакеги орнотулган. Суспензия агымынан тамчылар пайда болгондон кийин, тамчылардын ичинде заряд кармалып калат, ал андан кийин электростатикалык бурмалоо системасына кирет. Зарядка ылайык, система тамчыларды түрдүү идиштерге бурат. Төлөмдү колдонуу ыкмасы FACSде колдонулган ар кандай системаларга жараша өзгөрөт. FACSде колдонулган жабдуулар флуоресценттик активдештирилген клетка сорттору катары белгилүү.
Flow Cytometry жана FACS ортосунда кандай окшоштук бар?
Агым цитометриясы жана FACS клеткаларды оптикалык касиеттерине жараша айырмалоо үчүн иштелип чыккан
Агымдын цитометриясы менен FACSтин ортосунда кандай айырма бар?
Агым цитометриясы жана FACS |
|
| Агым цитометриясы – бул бир клетканы изилдөөгө мүмкүндүк берген клетканын бетинин ар кандай молекулаларына, өлчөмүнө жана көлөмүнө жараша клеткалардын гетерогендүү популяциясын талдоодо колдонулган методология. | FACS – бул клеткалардын үлгү аралашмасы жарык чачыратуу жана флуоресценттик мүнөздөмөлөрү боюнча эки же андан көп идиштерге сорттолгон процесс. |
Кыскача маалымат – Агым цитометриясы жана FACS
Клетка бардык тирүү организмдердин негизги структуралык жана функциялык бирдиги болуп саналат. Клеткаларды сорттоо – бул клеткалардын клетка ичиндеги жана клеткадан тышкаркы касиеттерине жараша бөлүү жана ар кандай категорияларга бөлүнүү процесси. Агым цитометриясы жана FACS клеткаларды сорттоодо эки маанилүү методология болуп саналат. Эки процесс тең клеткаларды оптикалык касиеттерине жараша айырмалоо үчүн иштелип чыккан. Агым цитометриясы – бул бир клетканы изилдөөгө мүмкүндүк берүүчү клетканын бетинин ар кандай молекулаларына, өлчөмүнө жана көлөмүнө жараша клеткалардын гетерогендүү популяциясын талдоодо колдонулган методология. FACS - бул клеткалардын үлгү аралашмасы жарык чачыратуу жана флуоресценттик мүнөздөмөлөрү боюнча эки же андан көп идиштерге сорттолгон процесс. Бул Flow Cytometry менен FACS ортосундагы айырма.
Flow Cytometry жана FACSтин PDF версиясын жүктөп алыңыз
Сиз бул макаланын PDF версиясын жүктөп алып, шилтеме эскертүүсүнө ылайык оффлайн максаттарында колдоно аласыз. Сураныч, PDF версиясын бул жерден жүктөп алыңыз Flow Cytometry жана FACS ортосундагы айырма
