pBR322 менен pUC19 ортосундагы негизги айырма pBR322 узундугу 4361 базалык жуп болгон плазмиддик вектор, ал эми pUC19 узундугу 2686 базалык жуп болгон плазмиддик вектор.
Клондоо вектору – бул организмде туруктуу сактала турган ДНКнын кичинекей бөлүгү. Бул ошондой эле клондоштуруу максатында чет өлкөлүк ДНК фрагменти киргизиле турган ДНКнын кичинекей бөлүгү. Вектор чет өлкөлүк ДНК фрагментин векторлорго ыңгайлуу киргизүүгө мүмкүндүк берүүчү маанилүү функцияларды камтыйт, мисалы, чектөө жерлери, тандалуучу маркер, репортер гени жана экспрессия элементи. Клондоо биринчи жолу E.coli. E. coli клондоочу векторлорго плазмидалар, бактериофагдар, космиддер жана бактериялык жасалма хромосомалар (БАК) кирет. Эң көп колдонулган векторлор гендик инженерияланган плазмидалар. pBR322 жана pUC19 плазмиддик векторлордун эки түрү.
pBR322 деген эмне?
pBR322 - плазмиддик вектор. Бул E. coli үчүн биринчи кеңири колдонулган клондоо векторлорунун бири. Бул вектор биринчи жолу 1977-жылы Сан-Францискодогу Калифорния университетинде Герберт Бойердин лабораториясында түзүлгөн. Бул узундугу 4361 жуп базалык болгон тегерек эки тилкелүү ДНК.
01-сүрөт: pBR322
Бул плазмиддик вектор өзгөчө өзгөчөлүктөргө ээ. Адатта, анын эки антибиотикке туруктуу гени бар: ампициллинге туруктуулукту коддоочу ген бла (AmpR) протеин жана тетрациклинге туруктуулукту коддоочу tetA гени (TetR) белок. Мындан тышкары, ал pMB1 репликациясынын келип чыгышын камтыйт. Бул плазмиддик вектордо плазмиддердин көчүрмөлөрүнүн санын чектөөчү коддоочу роп ген да бар. Мындан тышкары, бул вектор 40тан ашык чектөө ферменттери үчүн уникалдуу чектөө жерлерине ээ. Ошол кырк чектөө сайтынын он бири TetR генинде жайгашкан. TetR генинин промоутеринде HindIII жана ClaI чектөө ферменттери үчүн эки чектөөчү участок бар. Андан тышкары, AmpR генинин ичинде алты абдан маанилүү чектөө сайттары бар. pBR322 аз көчүрмө санын клондоо вектору болуп саналат. Ал болжол менен ар бир бактериялык клетканын 20 плазмидинин көчүрмөсүн камсыз кылат. Вектордун молекулалык салмагы 2,83×106 дальтон.
pUC19 деген эмне?
pUC19 - узундугу 2686 базалык жуп болгон плазмиддик вектор. Бул Йоахим Мессинг жана кесиптештери тарабынан түзүлгөн плазмиддик векторлордун серияларынын бири. Бул плазмид сериясы боюнча алгачкы иш Калифорния университетинде жүргүзүлгөн. Бул тегерек эки тилкелүү ДНК.
02-сүрөт: pUC19
Бул плазмиддик вектор маанилүү өзгөчөлүктөрдү камтыйт. Бул β глактозидаза (lacz) генинин N терминалдык фрагменти бар. Ошондой эле бир нече клондоо сайты (MCS) аймагы бар. Бул аймак lacz генинин 6 жана 7 кодондоруна бөлүнөт. MCS аймагы көптөгөн чектөөчү эндонуклеазаларды чектөө жерлерин камсыз кылат. β глактосидаза генинен тышкары, pUC19 ампициллинге туруштук берүүчү генди да коддойт (AmpR). Мындан тышкары, репликациянын келип чыгышы pMB1 плазмидинен алынат. pUC19 өлчөмү кичине болсо да, анын копия саны жогору (бактерия клеткасына 500-700 нуска). Бул плазмиддик вектордун молекулалык салмагы 1,75×106 дальтон.
pBR322 менен pUC19 ортосунда кандай окшоштуктар бар?
- pBR322 жана pUC19 плазмиддик векторлордун эки түрү.
- Алар coli үчүн популярдуу клондоочу векторлор.
- Эки плазмиддик вектор тең pMB1 плазмидинин репликация формасынын келип чыгышы бирдей.
- Бул векторлордун бир нече чектөө сайттары бар.
- Эки плазмиддик вектордун тең тандалуучу маркер катары ампициллинге каршылык гени бар.
pBR322 менен pUC19 ортосунда кандай айырма бар?
pBR322 - узундугу 4361 негизги жуп болгон плазмиддик вектор, ал эми pUC19 - 2686 негизги жуп узундуктагы плазмида вектору. Ошентип, бул pBR322 жана pUC19 ортосундагы негизги айырма. Андан тышкары, pBR322 - аз сандагы плазмиддик вектор, ал эми pUC19 - көп сандагы плазмиддик вектор.
Төмөнкү инфографикада pBR322 менен pUC19 ортосундагы айырмачылыктар жанаша салыштыруу үчүн таблица түрүндө берилген.
Кыскача маалымат – pBR322 менен pUC19
E.coli үчүн эң көп колдонулган клондоо векторлору гендик инженерияланган плазмиддер.pBR322 жана pUC19 плазмиддик векторлордун эки түрү. pBR322 узундугу 4361 базалык жуп болгон плазмиддик вектор, ал эми pUC19 узундугу 2686 негизги жуп болгон плазмида вектору. Демек, бул pBR322 менен pUC19 ортосундагы негизги айырма.
