Негизги айырмасы – Нитроцеллюлоза менен нейлон мембранасы
Блотинг - молекулалык биологиядагы ДНКнын, РНКнын жана протеиндердин алардын аралашмаларынан белгилүү ырааттуулугун аныктоонун маанилүү ыкмасы. Бул блот деп аталган кабыкчанын жардамы менен жасалат. Түндүк, түштүк жана батыш тазалоо сыяктуу ар кандай тазалоо ыкмалары бар. Тазалоо процесси үчүн туура мембрананы тандоо спецификалык эмес байланышты жана туура эмес аныктоону алдын алуу үчүн кылдаттык менен жасалышы керек. Нитроцеллюлоза, нейлон жана PVDF көбүнчө тазалоо ыкмаларында колдонулган мембраналар болуп саналат. Алар ар кандай өзгөчөлүктөргө ээ. Нитроцеллюлоза менен нейлон мембранасынын ортосундагы негизги айырма, нитроцеллюлоза мембраналарында протеиндин иммобилизациясынын жогорку потенциалы бар, ал эми нейлондук мембраналар нуклеин кислотасынын иммобилизациясынын жогорку потенциалына ээ. Бирок мембраналардын эки түрү тең тазалоо ыкмаларында көп колдонулат.
Нитроцеллюлоза мембранасы деген эмне?
Нитроцеллюлоза мембранасы нуклеиндик кислота жана белокту тазалоо ыкмаларында кеңири колдонулган мембраналык чыпка. Ал жогорку протеин менен байланышуу мүмкүнчүлүгүнө ээ. Демек, нитроцеллюлоза мембраналары вестерн тазалоо техникасында кеңири колдонулат. Нитроцеллюлоза мембраналары бардык гибриддештирүүнүн ыкмаларына шайкеш келет жана тоскоолдуктарсыз жогорку байланыш жөндөмдүүлүгүн көрсөтөт. Нитроцеллюлоза мембраналары табигый түрдө гидрофильдүү. Алар молекулалар менен гидрофилдик өз ара аракеттенишүүдө жана аларды мембранага эффективдүү иммобилизациялоодо. Коммерциялык нитроцеллюлоза мембраналары эки тешикче өлчөмдө бар: 0,45 жана 0,2 мкм.
01-сүрөт: Вестерн тазалоодо колдонулган нитроцеллюлоза мембранасы
Нейлон мембранасы деген эмне?
Нейлон мембранасы - тазалоо ыкмаларында колдонулган коммерциялык мембрананын дагы бир түрү. Бул түштүк жана түндүк тазалоо үчүн нитроцеллюлоза мембраналар менен бирге колдонулат. Нейлон мембраналары ДНК менен байланышка жогорку жакындыгынан улам нитроцеллюлозага караганда түштүк тазалоо үчүн идеалдуу. Нейлон мембраналарынын бир нече уникалдуу өзгөчөлүктөрүнөн улам, изилдөөчүлөр көбүнчө нитроцеллюлоза мембранасынын ордуна түштүк жана түндүк тазалоо үчүн нейлон мембраналарын колдонушат. Нейлон мембраналар нитроцеллюлозадан айырмаланып, сыйрып алуу жана кайра текшерүү үчүн да сунушталат.
02-сүрөт: түштүктү тазалоо үчүн колдонулган нейлон мембранасы
Нитроцеллюлоза менен нейлон мембрананын ортосунда кандай айырма бар?
Нитроцеллюлоза vs Нейлон мембранасы |
|
| Нитроцеллюлоза мембраналары морт. | Нейлон кабыкчалары анча морт эмес. |
| Колдонуу | |
| Аларды иштетүү кыйын. | Аларды иштетүү оңой. |
| Шектенүү | |
| Колдоого алынбаган нитроцеллюлоза мембраналарын текшерүү кыйын. | Нейлон мембраналар менен кайра иштетүү оңой. |
| Ар кандай сактоо шарттары менен шайкештик | |
| Нитроцеллюлоза мембраналарынын ар кандай сактоо шарттарына туруштук бере турган күчү азыраак. | Нейлон мембраналар ар кандай сактоо шарттарына бекем жооп берет. |
| Колдонуу | |
| Алдын ала нымдоо керек. | Нейлон мембраналар үчүн алдын ала нымдоо талап кылынбайт. |
| Гидрофильдик жаратылыш | |
| Нитроцеллюлоза мембраналары табияты боюнча гидрофильдүү, бирок нейлондук мембраналарга караганда азыраак гидрофилдүү. | Алар табияты боюнча өтө гидрофилдүү. |
| Иммобилизация потенциалы | |
| Нитроцеллюлоза мембраналарынын нуклеиндик кислоталарга жакындыгы азыраак. Бирок анын белокторго жакындыгы жогору. | Нейлон мембраналары нитроцеллюлоза мембраналарына караганда нуклеиндик кислоталар менен жогорку байланыш потенциалына ээ. |
Кыскача маалымат – Нитроцеллюлозага каршы нейлон мембранасы
Нитроцеллюлоза жана нейлон мембраналар гелдеги лента үлгүсүн кайра чыгаруу үчүн тазалоо техникасында колдонулган атайын барактар. Алар аралашмалардан белгилүү бир ырааттуулукту же протеинди мембранада кыймылсыз кылуу аркылуу аныктоо мүмкүнчүлүгүн камсыздайт. Молекулалар мембранада иммобилизациялангандан кийин, аны маркировкаланган зонддор менен гибриддештирүү анализи үчүн субстрат катары колдонсо болот. Нитроцеллюлоза мембранасы протеиндер менен тыгыз байланышта болгондуктан, протеинди аныктоо үчүн көбүнчө western blotting техникасында колдонулат. Нейлон кабыкчалары көбүнчө түштүк жана түндүк тазалоо үчүн колдонулат. Бул нитроцеллюлоза менен нейлон мембрананын ортосундагы айырма.
