Атаандаштыкка жарамдуу жана атаандаш эмес ELISAнын негизги айырмасы - атаандаштыкка жарамдуу ELISA ингибитор антигенин колдонот, ал эми атаандаш эмес ELISA талдоо үчүн бөгөт коюу антигенин колдонбойт.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) – антителолор, антигендер, белоктор жана гликопротеиндер сыяктуу ар кандай максаттарды аныктаган иммунологиялык анализ. Бул аткаруу үчүн тез жана жөнөкөй ыкмасы болуп саналат. Демек, ал көбүнчө изилдөө жана диагностикалык максаттар үчүн колдонулат. ELISA ферменттерди колдонууну жана антитело менен антигендин өзгөчө байланышын камтыйт. Реакциялардын пайда болушуна жараша, ИФАнын төрт түрү бар: түз ELISA, кыйыр ELISA, сэндвич ELISA жана бөгөт коюу ELISA. Түз, кыйыр жана сэндвич ELISA атаандаштыкка жараксыз ELISA түрлөрү болуп саналат, ал эми бөгөт коюу ELISA толук ELISA бир түрү болуп саналат. Бул макаланын негизги максаты - атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISA ортосундагы айырманы талкуулоо.
Конкуренттүү ELISA деген эмне?
Конкуренттүү ELISA үлгүдөгү антиген концентрациясын сигнал интерференциясын аныктоо аркылуу өлчөйт. Бул жерде анализ ингибитор антигенди колдонот. Демек, бул тыюу салуу ELISA бир түрү болуп саналат. Бул процедуранын жүрүшүндө үлгүдөгү антигендер белгиленген антителолордун белгилүү бир өлчөмү менен байланышуу үчүн тандалган эталондук антиген менен атаандашат. Мындан тышкары, бул процедура энбелгиленген антителолордун ашыкча көлөмү менен үлгүнү инкубациялоо менен башталат. Ошондой эле, эталондук антиген бир нече скважинанын анализдик пластинасына алдын ала капталган болушу керек. Андан кийин үлгү аралашмасы эталондук антигенди камтыган анализдик пластинкага кошулушу керек. Бош антителолор үлгүдөгү антигендин санына жараша эталондук антиген менен байланышат. Демек, көбүрөөк үлгү антиген бар болсо, азыраак шилтеме антиген аныкталат. Ошентип, ал начарыраак сигнал жаратат.
01-сүрөт: ELISA
Ал эми үлгүдө антиген азыраак болгондо, көбүрөөк шилтеме антиген антителолорду ээлеп, күчтүү сигнал берет. Конкуренттүү ELISA үлгү антигендер аз санда болгондо күчтүүрөөк сигнал бергендиктен, атаандаш ELISA антигендер аз сандагы үлгүлөр үчүн да өтө сезгич анализ болуп саналат.
Кээ бир атаандаштыкка жөндөмдүү ELISA комплекттеринде энбелгиленген антителонун ордуна энбелгиленген антиген колдонулат. Бул жерде белгиленген антиген жана үлгү антиген негизги антитело менен байланыш үчүн атаандашат. Ошо сыяктуу эле, үлгүдөгү антигендин саны аз болгондо, антителолор менен байланышуучу белгиленген антигендин саны жогору болуп, күчтүү сигнал жаратат.
Конкурентсиз ELISA деген эмне?
ИФАнын төрт түрүнүн ичинен үч түрү атаандаш эмес ELISA болуп саналат. Алар түз ELISA, кыйыр ELISA жана сэндвич ELISA. Үч формат тең ELISAнын жалпы принцибинде иштейт, алардын методологиясында бир аз айырмачылыктар бар.
Direct ELISA энзим менен белгиленген негизги антитело колдонот. Демек, ал экинчи антитело талап кылбайт. Ошондуктан, түздөн-түз ELISA ELISA башка түрлөрүнө караганда тезирээк. Негизги антитело түздөн-түз пластинадагы иммобилизацияланган максаттуу антиген менен байланышат. Демек, фермент-субстрат реакциясы ишке ашып, көрүнүп турган сигнал пайда болот.
02-сүрөт: Сэндвич ELISA
Түз ELISAдан айырмаланып, кыйыр ELISA белгиленбеген негизги антителону жана экинчилик антитело менен белгиленген ферментти колдонот. Негизги антитело иммобилизацияланган антиген менен байланышкандан кийин, экинчилик антитело негизги антитело менен байланышат. Экинчилик антителодогу фермент антиген менен реакцияга кирип, көрүнүүчү сигнал чыгарат. Сэндвич ELISA түз жана кыйыр ELISAдан айырмаланат. Бул жерде антитело анализ плитасынын дубалына иммобилизацияланган.
Атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISA менен кандай окшоштуктар бар?
- Конкуренттүү жана атаандаш эмес ELISA - иммуносорбенттик анализдин эки түрү.
- Алар өтө ийкемдүү жана сезимтал ыкмалар.
- Мындан тышкары, атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISA ферменттерге байланышкан иммундук анализдер.
- Ошондой эле эки ыкма тең фермент-субстрат реакциясынан улам сигнал жаратат.
Атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISAнын ортосунда кандай айырма бар?
Конкурстук ELISA - бул белгилүү антителолордун чектелген саны үчүн аналитикалык антиген менен белгиленген антигендин ортосундагы аяктоого таянган ИФАнын бир түрү. Башка жагынан алганда, атаандаштыкка туруштук бербеген ИФАда кызыккан антиген менен референттик антигендин ортосунда мындай атаандаштык жок. Ошентип, бул атаандаштык жана атаандаштык эмес ELISA ортосундагы негизги айырма. Ошо сыяктуу эле, атаандаштык ELISA ингибитор ELISA болуп саналат, ал эми атаандаштык эмес ELISA бөгөт коюу ELISA эмес. Демек, бул да атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISA ортосундагы айырма.
Мындан тышкары, атаандаштыкка жөндөмдүү ELISA кызыкдар антигендин аз санын өлчөө үчүн ылайыктуу. Бул сезимтал ыкма болуп саналат. Башка жагынан алганда, атаандаштык эмес ELISA үлгүдөгү антигендердин санына көз каранды эмес. Демек, бул да атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISA ортосундагы айырма.
Төмөндө инфографика атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISA ортосундагы айырманы салыштырып түшүндүрөт.
Кыскача маалымат – Конкуренттүү жана атаандаш эмес ELISA
Атаандаштыкка жөндөмдүү жана атаандаш эмес ELISA ИФАнын же ферментке байланышкан иммуносорбенттик анализдердин эки негизги түрү. Конкуренттүү жана атаандаш эмес ИФАнын ортосундагы айырманы жалпылоодо, атаандаштыкка жөндөмдүү ELISA кызыкдар антиген менен референттик антигендин ортосундагы антителолордун чектелген санына карата атаандашууга таянат. Ошондуктан, атаандаштык ELISA да бөгөт коюу ELISA деп аталат. Башка жагынан алганда, атаандаштыкка жарамсыз ELISA максаттуу антигендер менен шилтеме антигендер ортосундагы атаандаштыкка таянбайт. Ал кызыккан аналитти көздөй белгиленген антителолордун ашыкчасын колдонот. Ошентип, бул атаандаштык жана атаандаштык эмес ELISA ортосундагы негизги айырма. Түз ELISA, кыйыр ELISA жана сэндвич ELISA - атаандаш эмес ELISAнын үч негизги түрү.
