Электропорация менен микроинъекциянын ортосундагы негизги айырма - бул электропорация ДНКны кабыл алуучу клеткаларга жеткирүү үчүн жогорку чыңалуудагы электр импульсун колдонгон ыкма, ал эми микроинъекция - бул ДНКны жеткирүү үчүн ичке учтуу айнек ийнени же микропипетти колдонгон ыкма. хост клеткалары.
Трансформация – бул бөтөн ДНКнын кабыл алуучу клеткаларга өтүү процесси. Трансформация аркылуу организмдин генетикалык түзүлүшүн өзгөртүүгө болот. Ар кандай химиялык, биологиялык жана физикалык трансформация ыкмалары бар. Кээ бирлери түз ыкмалар болсо, кээ бирлери кыйыр ыкмалар. Электропорация жана микроинъекция эки физикалык ыкма болуп саналат, алар түз трансформация ыкмалары. Электропорация ДНКны кабыл алуучу клеткаларга киргизүү үчүн биологиялык клетка мембраналарында микроскопиялык тешикчелерди пайда кылуу үчүн электр талаасын колдонот. Ал эми микроинъекция микропипетка же учтуу айнек ийне аркылуу ДНКны түз жеткирет.
Электропорация деген эмне?
Электропорация – бул ДНКны өсүмдүк клеткаларына жана протопластарга жеткирүүчү трансформациялоо ыкмасы. Бул техника жогорку чыңалуудагы электр импульсун колдонот. Өсүмдүк материалдары ДНКсы бар буфердик эритмеде инкубацияланат. Андан кийин эритме жогорку чыңалуудагы электр импульсуна дуушар болот. Өсүмдүк клеткасынын мембраналарында жогорку вольттуу индукцияланган тешикчелер түзүлөт жана бул тешикчелер аркылуу ДНК клеткалардын ичинде миграцияланып, өсүмдүк геномдук ДНКсы менен интеграцияланат. Бул ыкманын натыйжалуулугу өсүмдүк материалдарынан жана дарылоо шарттарынан көз каранды.
01-сүрөт: Электропорация
Трансформация электропорациянын жардамы менен жасалганда, клеткалардын 40-50% гана ДНКны алат. Болгондо да, бул ыкма менен трансформацияланган клеткалардын 50% гана жашай алат. Бирок бул ыкманы аткаруу оңой жана клеткалардын биологиялык түзүлүшүн же функциясын өзгөртпөйт. Мындан тышкары, аны клеткалардын кеңири диапазону үчүн колдонсо болот.
Микроинъекция деген эмне?
Микроинъекция – бул чоң клеткаларга ДНКны киргизүүдө өзгөчө пайдалуу болгон трансформация ыкмасы. Бул ыкма ДНКны өсүмдүк протопластарына же жаныбарлардын клеткаларына (ооциттер, жумурткалар жана эмбриондор) жеткирүү үчүн ичке учтуу айнек ийнени же микропипетти колдонот. Чынында, бул ыкма чычкан сыяктуу трансгендик жаныбарларды жасоого көбүрөөк ылайыктуу. Бул ыкмада ДНК түз ядрого же цитоплазмага киргизилет.
Электропорацияга окшош, микроинъекция түз трансформациялоо ыкмасы. Microinjection атайын микроскоп орнотуу астында жүзөгө ашырылат. Пипетканы, ийнени, микроскоптун стадиясын жана видео технологиясын кармоону компьютердик башкаруу бул техниканын эффективдүүлүгүн жогорулатты. ДНКны инъекциялоодо боёктун жардамы менен трансформацияланган клеткаларды оңой аныктоого болот. Ошондуктан трансформацияланган клеткаларды аныктоо үчүн өзүнчө ыкманы колдонуунун кажети жок. Эң негизгиси, микроинъекция процедурасы маркер генди талап кылбайт.
02-сүрөт: Микроинъекция
Андан тышкары, бул ыкма абдан эффективдүү жана кайталанса болот. Бирок, бул ыкма кымбат, убакытты талап кылат жана квалификациялуу инсанды талап кылат. Ошондой эле, бул ыкма менен аз сандагы клеткаларды гана дарыласа болот.
Электропорация жана микроинъекциянын кандай окшоштуктары бар?
- Электропорация жана микроинъекция экөө тең трансформация техникасынын эки түрү.
- Бул ыкмалар ДНКны өсүмдүк клеткаларына жана протопластарга жеткирет.
- Алар түз ыкмалар.
- Андан тышкары, алар физикалык же механикалык ыкмалар.
- Эки ыкма тең трансгендик өсүмдүктөр менен жаныбарларды өндүрүүдө пайдалуу.
Электропорация жана микроинъекциянын ортосунда кандай айырма бар?
Электропорация ыкмасы ДНКны киргизүү үчүн электр талаасын колдонот, ал эми микроинъекция ыкмасы ДНКны киргизүү үчүн микропипетка же майда учтуу айнек ийне. Ошентип, бул electroporation жана microinjection ортосундагы негизги айырма. Мындан тышкары, электропорация көбүнчө өсүмдүк клеткалары жана протопластар үчүн колдонулат, ал эми микроинъекция көбүнчө жаныбарлардын клеткалары үчүн колдонулат. Мындан тышкары, электропорация микроинъекция сыяктуу көп убакытты талап кылбайт.
Төмөндөгү инфографика электрпорация менен микроинъекциянын ортосундагы айырмачылыктарды таблица түрүндө жалпылайт.
Кыскача маалымат – Электропорация жана микроинъекция
Электропорация жана микроинъекция генди өткөрүүнүн эки физикалык ыкмасы. Электропорация жогорку чыңалуудагы электр талаасын колдонот, ал эми микроинъекцияда айнек ийне же микропипетка колдонулат. Ошентип, бул electroporation жана microinjection ортосундагы негизги айырма. Бирок эки ыкма тең экзогендик ДНКны кабыл алуучу клеткаларга түз киргизет.
